第巧卷分析化学(FENxIHUAXUE)研究报告9第期2朋7年9月C卜j~Jou印习of为lal，tic目伪emisl叮279~12吕4黄琴昔键合硅胶固定相的制备和表征李来生‘陈雄泉杨汉荣吴宇梅(南昌大学分析测试中心，南昌33以”7)要采摘用固液相表面连续反应法，以，氨丙基三乙氧基硅烷CrM巧50)为偶联剂，制备了一种新型天然配黄芬背体键合硅胶固定相(BBsP)。采用红外光谱、热重分析和元素分析进行结构表征。以不同结构的溶质探针，初为步评价了新固定相的基本色谱性能，探讨了色谱分离机理。结果表明，该固定相具有较弱的反相色性能，除谱疏水作用外，还存在较强的电荷转移和氢键作用。与ODs相比，协同作用使B旧SP对芳香族化合物现出较表好的色谱分离选择性。由于极性的酞胺官能团和内部亲水性葡萄糖基的存在，能有效抑制亲硅醇基应，从而能效较好地分离碱性化合物。此外，实验发现新固定相对黄酮类化合物有很强的选择性保留，预示其分离富在集黄酮类化合物方面具有应用潜力。健词高关效液相色谱法，黄芋昔键合固定相，天然配体，黄苏昔，色谱性能评价1引言统的十八传烷基键合硅胶(ODS)因具有往效高、稳定性好、适用范围广、使用方便等优点而成为“广谱型”固定相〔‘，zJ。但也存在一些不足，如分离某些极性物质尤其是碱性化合物时效果不佳，原因是硅胶表面残留有硅醇轻基。为此，人们设计了静电屏蔽烷基键合固定相用于反相色谱分离f，一5〕。在基质上键合极性配体如胺或酞胺，利用该基团与碱性溶质间的静电排斥作用抑制硅醇基效应，从而改善分离。黄晓佳等1‘〕制备了酞胺型固定相并评价了其色谱性能，发现该固定相对碱性物质有良好的分离能力。此外，在分离中草药极性提取物等复杂体系时，ODS的分离选择性有限。随着制药工业、生物工程和环境工程的发展，样品的多样性需要不同性能的固定相来解决分离难题。活性功能将成分键合到基质表面，可制备同时具有活性功能和色谱功能的固定相。目前，该类色谱固定相报道不多。1994年，Arn坦加ng等川首次制备了具有抗菌活性的万古霉素(vancolnycin)等3种大环抗生素键合硅胶固定相，并实现了70多对手性药物的分离。2001年，Massolinin等15]将青霉素酶键合到硅胶表面，分离了一系列苯氧烷基梭酸对映异构体，并用作表面催化剂用于制备光学纯氨基青霉素。House等[9]将萝芙木生物碱育亨宾(Yohimbine)及其同系物的轻基通过氨基甲酸乙醋键合到硅胶表面制成色谱固定相，研究发现该配基具有较高的手性辨识能力。由此可见，天然化合物独特的结构使其具有作为色谱配体的开发前景。统中药黄传荃为唇形科多年生黄芬属草本植物黄荃(反“翻沼山招ha石，趾瓜.反orgi)的千燥根，味苦，性寒，具有清热燥湿、泻火解毒、凉血、止血、除热安胎之功效。主要有效成分黄岑昔分子内具有典型的C6一{3一C‘黄酮基本骨架，且富含酚经基等极性基团，可与溶质发生多种作用，从而实现复杂混合物的分离。此外黄荃昔具有较强的抗菌谱，对痢疾杆菌、百喉杆菌、葡萄球菌等多种病菌有抑制作用。黄等普键合硅胶本身是一种新型抗菌材料，对生化样品适用性应更好。研究以固本液相表面连续反应法，以y一氨丙基三乙氧基硅烷(TM一50)为偶联剂，制备了一种新的含天然抗菌配体的键合相，即黄荃昔键合硅胶固定相(BBSP)。采用红外光谱、元素分析和热重分析对其进行了结构表征。以多种化合物为溶质探针，初步评价了新固定相的基本色谱性能，探讨了色谱分离机理，并将其与传统ODS固定相进行比较研究。结果表明，该固定相具有类似ODs的良好反相色谱性能，除疏水作用外，还能为溶质提供氢键作用、二一，共扼作用和。一，超共扼作用等位点，在电荷转移中作佣7刁2卜18收稿;2007仍一15接受文系本江西省教育厅科技项目基金资助(No.创刃7一18)卜.川苗】二lilaj日h已.召亡。@1仍.。。口万方数据分析化学第35卷为电子受体。与ODS相比，由于包埋了极性的酞胺官能团，属于静电屏蔽固定相，而且内层为亲水的葡萄糖基，因此对碱性物质有较好的分离。实验还发现，新固定相对黄酮类化合物有强的选择性保留预示其在分离富集黄酮类化合物中有应用价值。2实验部分21仪器与试荆高效液相色谱仪，由砚石A高压泵、sPD一Av紫外一可见光检测器(日本岛津公司)和N.20以〕双通道色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所)组成，配有7125型手动进样器(Rhe岭ne公司);ElementaryoOEL元素分析仪;Niolet一700型FTIR红外光谱仪(美国尼高力公司);DT刊旧热分析仪(日本岛津公司)。球型硅胶，10卜m，比表面积约为260~ZsomZ/9(青岛美高化工有限公