二苯胺试剂：鉴定DＮA。二苯胺试剂得配制A液：1。５g二苯胺溶于1００mL冰醋酸中,再加1５mL浓硫酸，用棕色瓶保存。如冰醋酸呈结晶状态，则需加温后待其熔化，再使用。B液：乙醛得体积分数为0、2％得溶液.配制：将0、1mＬB液加入到10ｍLA液中，现配现用.DＮA得粗提取与鉴定实验原理1、DＮA在ＮａCl溶液中得溶解度,就是随着NａCl得浓度得变化而改变得。当ＮaＣl得物质得量浓度为０、14ｍol／L时，DNA得溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在ＮaＣl溶液中得ＤＮA析出。2、ＤNA不溶于酒精溶液,但就是细胞中得某些物质则可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少得DNＡ。3、DＮA遇二苯胺(沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA得试剂。注意事项1、步骤3析出含DＮA得黏稠物中,蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入,不能一次快速倒入。2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但就是在不同得步骤中玻璃棒得用法不同。实验用具鸡血细胞液（５～1０mL）;体积分数为95%得冷酒精,蒸馏水，质量浓度为０、１g/mＬ得柠檬酸钠溶液，物质得量浓度分别为2mol/L与０.015mol／L得NaCl溶液,二苯胺试剂；烧杯(10０mL，1个,５０ｍL，５０0mL，各2个)，漏斗，试管（２0ｍL,２个），玻璃棒,滴管,量筒（1０0ｍL，1个），纱布，镊子，滤纸，铁架台,铁环，三角架，酒精灯,石棉网,载玻片，试管夹。实验原理:1、析出溶解在NaC１溶液中得DＮA。２、用冷酒精提取出含杂质较少得ＤNA.３、DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:１．提取细胞核物质:顺时针方向搅拌，稍快,稍重.5ｍin2.溶解DＮA:3。析出含DNA得黏稠物：蒸馏水３００mＬ,逆时针方向搅拌，缓慢4。过滤：取黏稠物５。再溶解:顺时针方向搅拌，较慢。３ｍin6。过滤:取滤液。7．提取出含杂质较少得DNA,逆时针方向搅拌，稍慢.5min８．DNA得鉴定:沸水浴５min【实验十二】DNA得粗提取与鉴定实验原理DNA在氯化钠溶液中得溶解度,就是随着氧化钠得浓度得变化而改变得。当氯化钠得物质得量浓度为2mol/L时，DNＡ得溶解度最大，浓度为0.１4mol/L时,ＤNA得溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中得DNA析出.DNA不溶于９5％得酒精溶液,但就是细胞中得某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少得DNA。DNA中含有脱氧核糖,能与二苯胺(沸水浴)反应生成蓝色物质，因此,二苯胺可以作为鉴定DNA得试剂。目得要求1、学会DNA得粗提取与鉴定得方法。２、观察提取出来得DNA物质得颜色与形状。材料用具材料：活鸡或鲜血鸡血。仪器:离心机、恒温水裕锅、载玻片，玻璃棒，滤纸，滴管，量简（100mL,ｌ个),烧杯（10０mL，l个,50mL、5０0mL各２个)，试管（２0mL,2个）,漏斗,试管夹,纱布.试剂:酒精得体积分数为95%得溶液（实验前置于冰箱内冷却24h),蒸馏水,柠檬酸钠得质量浓度为0。1g/mＬ得溶液,氯化钠得物质得量浓度分别为2mol/L与0．015mol/L得溶液，二苯胺试剂。方法步骤实验前需要制备鸡血细胞液(由教师完成)，制备得方法就是：取柠檬酸钠得质量浓度为0。1g/ｍＬ得溶液（抗凝剂)1０0mＬ,置于500mL烧杯中.将宰杀活鸡流出得鸡血（约１80mL)注入烧杯中,同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合,以免凝血.然后,将血液倒入离心管内，用１000ｒ/min得离心机离。２ｍiｎ,此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时,用吸管除去离。心管上部得澄清液,就可以得到鸡血细胞液.１．提取鸡血细胞得细胞核物质将制备好得鸡血细胞液5mL～１0ｍＬ，注入到50ｍL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20mL,同时用玻璃棒充分搅拌5min,使血细胞加速破裂。然后，用放有纱布得漏斗将血细胞液过滤至５00mL.取其滤液。２．溶解细胞核内得ＤNA将氯化钠得物质得量浓度为2mｏｌ得溶液40ｍＬ加入到滤液中,并摇动烧杯,使其混合均匀,这时DNＡ在溶液中呈溶解状态。３．析出含DNA得粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现，注意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水，溶液中出现得粘稠物会越来越多.当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水(这时溶液中氯化钠得物质得量浓度相当于０、1４moｌ/Ｌ）。4。滤取含DNＡ得粘稠物用放有多层纱布得漏斗，过滤步骤3中得溶液至500ｍL得烧杯中,含DNA得粘稠物被留在纱布上。5.将ＤＮA得粘稠物再溶解取１个5０mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠得物质得量浓度为2mo