会计学主要(zhǔyào)内容(1)掌握(zhǎngwò)花药培养和花粉培养的区别(2)了解花药最佳接种时期(3)掌握(zhǎngwò)花药培养的大致过程(4)掌握(zhǎngwò)花粉发育的四种途径(5)掌握(zhǎngwò)花粉培养的大致过程花的结构(jiégòu)花药是花的雄性器官，花药培养属器官培养；花粉是单倍体细胞，花粉培养与单细胞培养相似花药和花粉都可以在培养过程中诱导单倍体细胞系和单倍体植株。单倍体植株经过染色体加倍就成为纯合二倍体植株，这样(zhèyàng)可缩短育种周期，获得纯系。花培已成为植物育种的一种重要手段。植物的花粉是花粉母细胞经减数分裂(jiǎnshùfēnliè)形成的，其染色体数目只有体细胞的一半，叫做单倍体细胞(haploidcell)。花粉和花药的培养(pollenandantherculture)是指花粉在培养基上改变其正常发育和机能，不经受精而发生细胞分裂，由单个花粉粒发育成完整植株的技术。用离体培养花药的方法使花粉发育成一个完整的植株，叫做单倍体植物(haplobiont)。花药培养是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成(xíngchéng)花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。花粉和花药培养的研究(yánjiū)意义花药培养简史花药培养的主要目的，是培育花粉粒的单倍体植株，并使单倍体加倍，作为育种材料的来源。利用杂种花药离体培养获得的再生植株，由不同基因型的配子发育而来，具有丰富的变异类型，选择出有利的变异类型，经过经济性状鉴定后，选出优良者直接用于生产或配制杂交组合，获得优良杂交种子。构建永久性分离(fēnlí)群体－双单倍体系（Doubledhaploid)，用于基因定位。双单倍体：是指单倍体细胞（花粉或卵细胞）经过人工或自发加倍后得到双单倍体细胞，细胞经诱导分化可发育为单双倍体植株。大大缩短育种(yùzhǒng)周期确定取材时间选择大致处于所需要时期的花蕾。由于花粉发育时期和植株(zhízhū)的某些外部形态特征之间的大致相关性，因此利用这些外部标志，选择符合条件的花蕾，经镜检确定花粉发育的准确时期。在水稻中，以单核靠边期的花粉对诱导单倍体植株(zhízhū)较为适宜，在外部形态上可根据叶枕距为5～15cm，颖片（禾本科植物小穗基部，由苞片转变而成）淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2这些条件来判断。水稻(shuǐdào)花药培养选取主穗（一级侧枝）的花蕾，因为一级侧枝的花蕾发育良好，数量(shùliàng)大，发育同步。操作过程中不应使花药受到损伤，若受损伤，则应淘汰，因为损伤常常会刺激花粉壁形成二倍体的愈伤组织。光照(12~18h，5,000~10,000lx，28℃)黑暗(12-16h，22℃)周期交替(jiāotì)进行。①花粉发育时期是影响培养效果的重要因素在诱导花粉进行雄性发育(指小孢子沿孢子体途径发育成花粉植株)过程中，不同物种(wùzhǒng)花粉最适的发育时期不同，对多数植物来说，单核中期或晚期的花粉最容易形成花粉胚或花粉愈伤组织。如南洋金花、烟草和芍药中的最适时期是第一次有丝分裂时期或稍前后，禾本科植物在单核早期(大麦)或单核中期(玉米、小麦)反应最好，番茄在减数分裂中期时更适宜。②花药供体植株的生长条件对花药培养反应的影响很大例如：水稻、小麦、大麦等禾本科植物，主茎穗比分蘖穗花药愈伤组织的诱导(yòudǎo)率明显地提高，同步化程度高。③培养基是花药培养中影响花粉启动和再分化的重要条件我国科学工作者对水稻、小麦的花药培养基做了改进，研制出N6培养基。在N6培养基上，水稻花粉的出愈率大幅度提高。N6培养基的特点是铵离子浓度较低。随后，进一步降低铵盐和硝酸盐浓度，同时附加生物素，研制出C17和W14培养基，它们(tāmen)可以大幅度提高小麦的花药出愈率。以马铃薯提取液为基本成分的马铃薯培养液，现在被广泛地应用于小麦花药培养，效果良好。培养基中的植物生长物质(wùzhì)的种类会影响花粉发育的途径培养基中糖的种类(zhǒnglèi)对花粉胚的诱导和分化有显著影响在培养基中加入(jiārù)活性炭能促进花药培养以1～5℃预低温处理小麦幼穗，能提高花粉愈伤组织的产量(chǎnliàng)。例如，在4℃下冷冻石刁柏花蕾，预处理4天、8天和12天，愈伤组织诱导率比室温对照分别提高2.4倍、1.9和1.5倍。各种植物要求预处理的温度和时间不同。小麦要求先高温培养64天之后，再转入28～30℃下培养。一直高温培养效果并不好。较高的温度虽能诱导较高频率的花粉愈伤组织，但愈伤组织分化白化苗的频率也高。控制(kòngzhì)培养温度仍是减少白化苗的一个有效措施。3、花药培养过程(guòchéng)黄