奥美拉唑肠溶胶囊微生物限度检查方案一、设计目的奥美拉唑肠溶胶囊微生物限度检查方案主要通过平皿计数法测定一批奥美拉唑肠溶胶囊的需氧菌总数、霉菌及酵母菌来判断奥美拉唑肠溶胶囊的微生物限度是否符合质量要求，也以此来对奥美拉唑肠溶胶囊做出适当的卫生学评价。菌落的多少在一定的程度上标志着药品质量的优劣，如果菌落总数过多，说明药品卫生质量不达标，使用就有可能会影响药品的质量从而危害人体的健康安全。在微生物限度检验过程中，通过对不同菌液稀释的浓度、培养时间以及其供试品浓度的把握，找出最佳方法。二、设计依据奥美拉唑肠溶胶囊的微生物限度检测方案参照《中国药典》2020版四部、国家食品药品监督管理局标准及企业标准而设计。三、设计方案（一）采用方法：奥美拉唑肠溶胶囊采用微生物限度检查中的平皿法来检测，平皿法包括倾注法和涂布法。除另有规定外，取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定，每稀释级每种培养基至少制备2个平板。主要检测奥美拉唑肠溶胶囊需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数的检查和控制菌检查。（二）检测时使用的仪器和器具立式压力蒸汽灭菌器(型号LDZX-75KBS编号01Ⅲ233）百级净化干热灭菌器（型号GDS-024D编号01Ⅲ101）电子天平（型号PB602-N型编号01Ⅲ066）霉菌培养箱（型号BMJ-400编号01Ⅲ246）生化培养箱（型号SPX-250B-Z编号01Ⅲ027）生化培养箱（型号LBI-250编号01Ⅲ206）电热恒温水浴锅（型号HHW4203编号01Ⅲ025）无菌移液管1ml、10ml无菌锥形瓶100ml、250ml无菌培养皿φ90mm╳15mm无菌试管、无菌服、量筒、酒精灯、镊子、酒精棉、剪刀、记号笔、接种环等。（三）检测时所需的培养基、试液配制以及灭菌1、胰酪大豆琼脂培养基（TSA）干粉批号：200325生产厂家：北京三药科技有限开发公司配制方法:取胰酪大豆琼脂培养基10.00g，用量筒加纯化水250ml，共配250ml，摇匀溶解。2、胰酪大豆液体培养基（TSB）干粉批号：2005084生产厂家：北京三药科技有限开发公司配制方法:取胰酪大豆液体培养基2.98g，用量筒加纯化水100ml，共配100ml，摇匀溶解。3、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）干粉批号：191129生产厂家：北京三药科技有限开发公司配制方法:取沙氏葡萄糖琼脂培养基16.25g，用量筒加纯化水250ml，共配250ml，摇匀溶解。4、麦康凯琼脂培养基（MCA）干粉批号：1906032生产厂家：北京三药科技有限开发公司配制方法:取麦康凯琼脂培养基12.50g，用量筒加纯化水100ml，共配100ml，摇匀溶解。5、麦康凯液体培养基（MCB）干粉批号：191127生产厂家：北京三药科技有限开发公司配制方法:取麦康凯液体培养基3.50g，用量筒加纯化水100ml，共配100ml，摇匀溶解。6、PH6.8磷酸盐缓冲液磷酸氢二钾批号：20200110氢氧化钠批号：20190404生产厂家：北京三药科技有限开发公司配制方法:取磷酸氢二钾3.40g和氢氧化钠0.47g,用量筒加纯化水300ml，超声溶解，再分装到100ml锥形瓶里面即可。7、0.9％无菌氯化钠溶液配制方法：取氯化钠1.46g,用量筒加纯化水100ml,再分装9ml到每个试管中，为0.9％无菌氯化钠溶液试管。所有培养基配制准备完成后，将使用立式压力蒸汽灭菌器进行灭菌，灭菌温度及时间为121℃、15min。（四）检测步骤1、供试品制备：准确称取奥美拉唑肠溶胶囊10.00g，加入含有30％的聚山梨酯80的PH6.8磷酸盐缓冲液至100ml，充分振摇，使供试品分散均匀，再放入电热恒温水浴锅使奥美拉唑肠溶胶囊溶解，溶解完全后，制成1:10供试液，取1:10的供试液加1ml稀释到0.9％无菌氯化钠溶液中作为1:100的供试液。2、奥美拉唑肠溶胶囊胰酪大豆琼脂培养基（TSA）检测：取1:10供试液1ml的上清液，置培养皿中，制备两个平行样，此培养皿标记为奥美拉唑肠溶胶囊-1，再取1:10的供试液到0.9％无菌氯化钠溶液试管中，将试管震荡摇匀，为1:100的供试液，取1:100供试液1ml置平皿中，制备两个平行样，此培养皿标记为奥美拉唑肠溶胶囊-2。随后倾注15~20ml胰酪大豆琼脂培养基，待凝固后，倒置培养，置30~35℃生化培养箱培养3天，观察结果并计数。胰酪大豆琼脂培养基（TSA）检测奥美拉唑肠溶胶囊需氧菌总数。3、奥美拉唑肠溶胶囊沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）检测：取1:10供试液1ml的上清液，置培养皿中