生物技术制药第四章抗体制药第一节概述单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用第二节单克隆抗体单克隆抗体和多克隆抗体的制备第二节单克隆抗体一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫二、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养二、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养二、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养二、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养二、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养三、筛选阳性克隆与克隆化1、精制破伤风毒素抗原（）吸附三、筛选阳性克隆与克隆化三、筛选阳性克隆与克隆化四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定五、单克隆抗体的大量制备五、单克隆抗体的大量制备六、单克隆抗体的纯化六、单克隆抗体的纯化续（2）离子交换法在最适离子强度及pH条件下，以离子交换层析分离单克隆抗体可以纯化25~100倍。高容量、高流速、化学稳定的新型离子交换剂适宜单克隆抗体的大规模纯化。（3）亲和层析多用蛋白A亲和层析，适用于IgG类单克隆抗体的纯化。IgG与蛋白A的结合与pH有密切关系，鼠源性单克隆抗体在pH8.0时，IgG2b、IgG3几乎全部结合于蛋白A柱上，IgG1稍差，用pH3.5缓冲液可洗脱IgG2b，pH4.0缓冲液可洗脱下IgG3，pH4.5缓冲液可洗脱下IgG2a，pH6.0可洗脱下IgG1。用蛋白A亲和层析收获的抗体纯度很高，但也有极微量的杂蛋白。第三节鼠源性单克隆抗体的改进一、人-鼠嵌合抗体二、改形抗体三、小分子抗体四、双功能抗体五、抗体融合蛋白五、抗体融合蛋白第四节基因工程抗体和抗体工程二、噬菌体抗体库技术的特点三、基因工程抗体的表达第五节抗体诊断试剂二、免疫标记技术用的抗体类试剂二、免疫标记技术用的抗体类试剂二、免疫标记技术用的抗体类试剂三、导向诊断药物第六节抗体治疗药物第二节单克隆抗体一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫二、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养三、筛选阳性克隆与克隆化续（2）离子交换法在最适离子强度及pH条件下，以离子交换层析分离单克隆抗体可以纯化25~100倍。高容量、高流速、化学稳定的新型离子交换剂适宜单克隆抗体的大规模纯化。（3）亲和层析多用蛋白A亲和层析，适用于IgG类单克隆抗体的纯化。IgG与蛋白A的结合与pH有密切关系，鼠源性单克隆抗体在pH8.0时，IgG2b、IgG3几乎全部结合于蛋白A柱上，IgG1稍差，用pH3.5缓冲液可洗脱IgG2b，pH4.0缓冲液可洗脱下IgG3，pH4.5缓冲液可洗脱下IgG2a，pH6.0可洗脱下IgG1。用蛋白A亲和层析收获的抗体纯度很高，但也有极微量的杂蛋白。二、噬菌体抗体库技术的特点第五节抗体诊断试剂