考纲考情考情播报【知识梳理】一、DNA和蛋白质技术1.DNA的粗提取与鉴定：(1)基本原理：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在_______________方面的差异，提取DNA，去除其他成分。(2)DNA的粗提取原理。①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中_______不同。在NaCl溶液浓度为____________时，DNA的溶解度最小。②DNA不溶于_____溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。(3)主要步骤及注意事项：实验材料的选取→破碎细胞→获取含DNA的滤液→过滤，取滤液去除滤液中的杂质→DNA的析出→利用DNA不溶于_______________的原理，析出DNA。DNA的鉴定→③PCR条件过程控制：控制_____使DNA复制在体外反复进行。(2)PCR过程：变性→复性→延伸→(3)PCR结果：两引物间固定长度的DNA序列呈_____扩增(即2n)。3.血红蛋白的提取和分离：(1)常用方法(2)实验步骤：样品处理(红细胞的洗涤→_________的释放→分离血红蛋白溶液)→粗分离→_____→纯度鉴定。二、植物有效成分的提取1.提取玫瑰精油实验：(1)方法：___________法。(2)实验流程：鲜玫瑰花___________→油水混合物玫瑰油除水分离油层2.提取橘皮精油的实验：(1)方法：一般采用_____法。(2)实验流程：石灰水浸泡→漂洗→_____→过滤→静置→再次_____→橘皮油3.胡萝卜素的提取：(1)胡萝卜素的性质(2)胡萝卜素的提取(3)胡萝卜素的提取流程：胡萝卜→粉碎→_____→萃取→_____→浓缩→胡萝卜素(4)胡萝卜素的鉴定：_______法。【速记卡片】1.DNA的粗提取与鉴定：(1)DNA的溶解性：DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最小；DNA不溶于酒精溶液，而某些蛋白质则溶于酒精溶液，据此也可使DNA和蛋白质分离。(2)DNA的耐受性：DNA对酶、高温和洗涤剂都具有较好的耐受性。(3)DNA的鉴定：DNA在沸水浴的条件下，遇二苯胺会被染成蓝色。2.PCR技术：(1)PCR原理：PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，需提供DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶。(2)PCR过程：通过控制温度使DNA复制在体外反复进行，每一个循环包括变性→复性→延伸。3.血红蛋白的提取和分离：(1)凝胶色谱法：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。(2)电泳法：利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。4.植物有效成分的提取：(1)植物芳香油的提取方法：压榨法、蒸馏法和萃取法等。(2)芳香油的性质：不溶于水，易溶于有机溶剂，因此可用有机溶剂作为提取剂来提取芳香油。(3)胡萝卜素的性质：是橘黄色结晶，从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用亲脂(水不溶)性有机溶剂(或有机溶剂)作萃取剂。(4)胡萝卜素的提取方法：萃取法。(5)胡萝卜素的鉴定：纸层析法，在鉴定过程中需要用标准样品对照。考点一DNA和蛋白质技术1.DNA与蛋白质在物理化学性质方面的差异：比较项目2.比较细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR)：项目项目3.血红蛋白的提取和分离：(1)凝胶色谱法：(2)主要实验步骤及意义：①红细胞的洗涤：去除杂蛋白等↓样品处理→②释放血红蛋白：红细胞吸水破裂↓③分离血红蛋白：离心处理，获得血红蛋白溶液①方法：透析②目的：除去样品中相对分子质量较小的杂质①方法：凝胶色谱法②目的：根据蛋白质的相对分子质量大小去除杂蛋白①方法：SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳②迁移率：取决于蛋白质分子的大小【提分技法】凝胶色谱法和电泳法分离蛋白质的方法分析(1)凝胶色谱法：只看蛋白质的相对分子质量大小，先洗脱出来的相对分子质量大。(2)电泳法。①特点：移动速度由多种因素共同决定，包括待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同。②常用方法：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，带电性质和电量主要取决于SDS-聚丙烯酰胺凝胶颗粒，分离效果只看蛋白质的相对分子质量大小。【考题回访】1.(2013·广东高考改编)地中海贫血症属于常染色体遗传病。一对夫妇生有一位重型β地中海贫血症患儿，分析发现，患儿血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了点突变(C→T)。用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段l，突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s；但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切，如图a。目前