知识一特定成分的提取与PCR技术一、特定成分的提取玫瑰精油二、PCR技术1.PCR原理:①DNA复制原理,在体外DNA双螺旋的打开可以通过控制温度来实现,即:双链DNA 单链DNA过程3.结果:上述三步反应完成后,一个DNA分子就变成了⑦两个DNA分子,随着重复次数的增多,DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。 1.生物组织中有机物的提取方法有很多种。例如,凝胶色谱法、电泳法、蒸馏法、压榨法和萃取法等,不同的有机物提取的方法各有不同。(1)玫瑰精油称为“液体黄金”,是世界香料工业不可取代的原料,提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加剂或化学原料,其提取方法主要是。(2)杏仁油富含矿物质和维生素,是一种质地轻柔、高渗透性的保湿剂,主要通过法提取。(3)萃取胡萝卜素前,要将胡萝卜彻底粉碎的主要目的是(4)血红蛋白的提取方法可以采用,该方法主要是利用血红蛋白的哪一特性将它与其他物质分开的?。(5)DNA提取时,可以利用DNA在而析出,为了纯化提取的DNA,向DNA滤液中加入嫩肉粉,目的是,DNA鉴定时,使用试剂在沸水中加热呈现蓝色。 答案(1)水蒸气蒸馏法(2)压榨(3)使原料颗粒变小,提高萃取效率(4)凝胶色谱法相对分子质量的大小(5)浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度小分解蛋白质二苯胺 解析(1)玫瑰精油不能含有任何添加剂或化学原料,所以不能用萃取法,而其又具有挥发性较强的特点,适于用水蒸气蒸馏法提取。(2)杏仁油的提取原料为种子,应采用压榨法。(3)一般来说,原料颗粒小,萃取温度高,时间长,需要提取的物质就能够充分溶解,萃取效果就好。(4)凝胶色谱法也称做分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。(5)DNA在不同NaCl溶液中溶解度不同,可以使DNA溶解或析出从而与其他物质分开。2.在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题: (1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复制这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为。(4)PCR反应过程的前提条件是,PCR技术利用DNA的原理解决了这个问题。(5)在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是。 答案(1)5'—G—A—OHHO—A—G—5'5'—G—G……T—C—3'(2)3'—C—C……A—G—5'5'—G—G……T—C—3'5'—G—G……T—C—3'3'—C—C……A—G—5'(3)每个DNA分子各有一条链含32P1/2n(4)DNA解旋热变性(5)蛋白酶 解析(1)DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3'端延伸DNA链,所以引物就提供了3'端,子链延伸方向为5'→3',引物Ⅰ与b链部分碱基互补,引物Ⅱ则与a链部分碱基互补,且连接到a链的3'端,故引物Ⅱ的结构为5'—G—A—OH。(2)经过一次循环后,产生的两个DNA分子分别含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。(3)由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32P标记,所以新合成的子链均含有放射性,一次循环后的两个DNA各有一条链含32P,若复制n次,共产生子链2n×2,其中只有DNA母链不含32P,则其所占比例为2/(2n×2)=1/2n。(4)DNA复制是以两条母链为模板,按照碱基互补配对原则进行的。因此,首先要解旋,使两条母链碱基暴露出来,才能按照碱基互补配对的原则把相应的核苷酸一个个地连接起来。DNA分子在80℃~100℃的温度范围内变性,双链解开成单链,当温度慢慢降低时,又能重新结合形成双链。(5)本题考查了DNA中杂质蛋白质的去除,利用酶的专一性,应加入蛋白知识二植物组织培养 一、培养基1.成分2.类型:MS培养基(植物组织培养基)、发芽培养基和生根培养基。3.作用:为植物组织或器官生长和发育提供③营养条件。4.制备:配制各种母液→配制培养基→④灭菌。二、组织培养1.含义:在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成①完整的植株。2.原理:植物细胞具有②全能性。3.过程:组织、器官 愈伤组织 根、芽 植物4.脱分化和再分化的比较 1.请回答下列与菊花茎段组织培养实验操作有关的问题。(1)由于菊花茎段组织培养