医疗器械微生物检验概述概述真核类：真菌，原生动物，显微藻类非细胞类：病毒，亚病毒若平板上生长的菌落与上表所列的菌落形态特征相符或疑似，用接种针挑选2~3个菌落分别于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养18~24小时，如斜面未见红色、底层未见黄色；阴性对照管的血浆应流动自如，阳性对照管血浆应凝固，若试验管血浆凝固者为血浆凝固酶试验阳性，否则为阴性。多数细菌生长的适宜pH值为7.铜绿假单胞菌典型菌落呈扁平、无定形、周边扩散、表面湿润，灰白色，周围时有蓝绿色素扩散。环境清洁，表面消毒（75%(V/V)乙醇、新洁尔灭(1:1000)溶液或其他适宜消毒溶液）若试验组的菌数回收率均不低于70%，可照该供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌、霉菌及酵母菌数；若平板上无菌生长，或生长的菌落不同于下表所列的特征，判供试品未检出沙门菌。验证试验至少应进行3次独立的平行试验，并分别计算各试验菌每次试验的回收率。要求检查沙门菌的供试品，其检验应增加20g或20ml（其中10g或10ml用于阳性对照试验）。上述2份供试液直接或处理后分别接种至100ml的0.SCDLP培养基、溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基、氧化酶试验、绿脓菌素试验、硝酸盐还原产气试验、明胶液化试验42℃生长试验2ml，接种至含5mlMUG培养基的试管内，培养，于5小时、24小时在366nm紫外线下观察，同时用未接种的MUG培养基作本底对照。确证试验从上述分离平板上挑选4~5个疑似菌落，分别接种于乳糖发酵管中，培养24~48小时。取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液，加至适量的稀释剂中，混匀，过滤。取上述培养物，划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基的平板上，培养18~24小时。特点：1、个体微小，一般<0.具抑菌活性的供试品：培养基稀释法、离心沉淀法、薄膜过滤法、中和法;常用检测标准项目实验条件无菌操作技术实验环境实验器具实验准备实验环境保证实验试液培养基培养基灭菌方式计数培养基适用性检查计数培养基适用性检查ISO11737-1:2006Sterilizationofmedicaldevices–Microbiologicalmethods—Part1:Determinationofapopulationofmicroorganismsonproducts取斜面培养物进行革兰染色、镜检及氧化酶试验。葡萄糖肉汤、血琼脂培养基、链球菌试验、杆菌肽敏感试验若平板上无菌落生长，判供试品未检出梭菌；0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml浸泡，振摇，作为1：10的供试液;如平板上无菌落生长或生长的菌落与上述菌落形态特征不符，判供试品未检出铜绿假单胞菌。取供试液10ml（相当于供试品1g，1ml）2份，其中1份置80℃保温10分钟后迅速冷却。SCDLP培养基、血琼脂培养基、甘露醇发酵试验、血浆凝固酶试验庖肉培养基、含庆大霉素的哥伦比亚琼脂培养基、过氧化氢酶试验检验量：除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基黑曲霉孢子悬液可保存在2℃～8℃，在验证过的贮存期内使用。菌落形态根据大肠菌群的检出管数，按下表报告1g或1ml供试品中的大肠菌群数。定性：沙氏液体培养基7天亚碲酸钠（钾）肉汤（或营养肉汤）培养基、卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露醇氯化钠琼脂培养基、血浆凝固酶试验培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。计数培养基适用性检查计数培养基适用性检查样品准备样品准备供试液制备细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数细菌、霉菌及酵母菌计数控制菌检查法验证控制菌检查法验证大肠埃希菌检验大肠埃希菌检验大肠埃希菌检验大肠埃希菌检验大肠菌群检验大肠菌群检验大肠菌群检验大肠菌群检验可能的大肠菌群数表沙门菌检验沙门菌检验沙门菌检验铜绿假单胞菌检验铜绿假单胞菌检验金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌检验梭菌检验白色念珠菌检验结果判断谢谢大家！知识回顾KnowledgeReview感谢观看