食品中空肠弯曲菌检测江苏出入境学习PPT教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-12 格式:PPTX 页数:40 大小:388KB 金币:10 举报 版权申诉
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粪便中空肠弯曲菌检测一、空肠弯曲菌的分类和特性:空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni)是从20世纪80年代起受到国内外广泛重视的人畜共患病菌。致病性:人类:急性细菌性肠炎、格林-巴利综合征(GBS)、食物中毒。动物:雏鸡腹泻与肝炎;火鸡的肝炎与蓝冠病。犊牛的腹泻;绵羊的腹泻或流产。空肠弯曲菌的生物学特性空肠弯曲杆菌的流行病学和临床表现细菌分布范围*该菌分布广泛,已从多种动物中分离出;也发现于食物与饮水中,尤其是畜禽肉及脏器与鲜奶。*食用动物中鸡的带菌率为首位,其次为猪。主要分布在活鸡的消化系统中如腺胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠、泄殖腔等。*该菌在人或动物的粪便中存活约4周;在被污染的水源中可存活约5周。根据美国疾病控制与预防中心(USA-CDC)多年的美国食源性病原微生物引起发病人数的统计资料,空肠弯曲菌导致的病例数排名第二。禽肉、生牛奶中的空肠弯曲菌被美国列为重点监测食源性致病菌之一。32ndCCFH(1999年)提出5组优先评估的“病原-食品”组合,其中包括“禽肉-空肠弯曲菌”。空肠弯曲菌在许多发达国家也是被报告最普遍的胃肠炎致病菌之一,如:美国、英国、丹麦、芬兰、爱尔兰、荷兰、挪威、瑞典、瑞士等。NCTC11168基因组图谱二、粪便中空肠弯曲菌的检验技术2012年试行江苏省感染性腹泻综合监测工作方案空肠弯曲菌设备和材料三气培养箱(如Binder等)弯曲菌检验程序增菌液接种mCCDA平板上所挑取的可疑菌落通常带有金属光泽、扁平、湿润、沿划线生长。CFA显色平板上所挑取的可疑菌落为红色、突起、湿润,菌落较小直径约2~3mm,边缘有一圈红色的透明环,中间有一个圆形的不透明、颜色较深的红色小点的菌落。将所挑取的3~5个可疑菌接种到不含抗生素的哥伦比亚血琼脂平板,微需氧条件下42±0.5℃培养24h-48h后,进行后续的空肠弯曲菌鉴定。空肠弯曲菌的鉴定快速鉴定快速鉴定快速鉴定快速鉴定后续鉴定1.微需氧条件下25℃生长试验2.有氧条件下42±0.5℃生长试验3.先锋霉素(头孢霉素)的敏感性检测(可选)ISO:奈啶酮酸的敏感性检测(越来越多的C.jejuni与C.coli的非特异性菌株出现)后续鉴定后续鉴定后续鉴定主要弯曲菌的生化特性与鉴定表:空肠弯曲菌结肠弯曲菌海鸥弯曲菌乌普萨拉弯曲菌.形态、动力性:革兰氏阴性,弯曲如小逗点状,两菌体的末端相接时呈S形或螺旋状或海鸥展翅状,并呈现螺旋样运动氧化酶试验:阳性过氧化氢酶试验:+++—或微弱马尿酸盐水解试验:+———吲哚乙酸脂水解试验:++—+先锋霉素敏感性:RRRS微需氧条件25℃生长试验:不生长有氧条件42生长试验:不生长(注:+阳性;—阴性;S敏感;R有抗性)已试用过的弯曲菌生化鉴定与筛选检测的商品化试剂微生物API鉴定系统C.2弯曲菌的筛选检测方法C.2.1miniVidas用于弯曲菌的初筛,原理为酶联荧光免疫分析(ELFA)方法。对于结果阴性的可以直接判定为阴性,对于结果阳性的需进一步确认,可比传统方法快2天。(具体参照厂家说明)C.2.2BAX系统原理为利用PCR进行基因检测,用于空肠弯曲菌和大肠弯曲菌的筛选,阳性结果仍需确认。空肠弯曲菌检测流程谢谢大家!空肠弯曲杆菌的流行病学和临床表现CFA显色平板上所挑取的可疑菌落为红色、突起、湿润,菌落较小直径约2~3mm,边缘有一圈红色的透明环,中间有一个圆形的不透明、颜色较深的红色小点的菌落。空肠弯曲菌的鉴定快速鉴定后续鉴定C.2弯曲菌的筛选检测方法C.2.1miniVidas用于弯曲菌的初筛,原理为酶联荧光免疫分析(ELFA)方法。对于结果阴性的可以直接判定为阴性,对于结果阳性的需进一步确认,可比传统方法快2天。(具体参照厂家说明)C.2.2BAX系统原理为利用PCR进行基因检测,用于空肠弯曲菌和大肠弯曲菌的筛选,阳性结果仍需确认。