常见传染病鼠疫（黑死病）传统的传染病诊断技术:一是根据临床症状判断，但这必须要求被感染者发病，根据病状进行判断，况且有些疾病临床表现非常相似，不具有典型性状，容易造成误诊！二是先对病原物质进行分离培养，对培养物进行生理生化检验，从而确定病原体的种类。这种方法需要花费较多时间，成本高速度慢效率低，另外，有些病毒类和衣原体类的病原体至今仍没有有效的体外培养方法，从而影响了诊断.现代生物技术的开发应用，为医疗卫生领域提供了崭新的诊断和监测技术。人们对疾病，特别是传染病的诊断，一个很重要的问题就是如何尽早检测感染因子的种类，因为它对疾病的针对性治疗及其预后有着极其重要的意义。一.ELISA技术与单克隆抗体2.常用的ELISA诊断技术夹心法3.基因工程抗原缺点：首先，抗原生产过程本身就有很大的危险。因为制造抗原时，要大量培养病原体，如果这些病原体逸出，将会造成很大危害；其次，产品的质量难以控制，难以标准化，从而导致各批次产品质量的差异；最后，生产费用高，特别是那些体外不能培养的病原体更是如此。利用基因工程技术可以克服ELISA技术中需要制备抗体和抗原过程中的不足。同疫苗生产一样，将抗原基因克隆在细菌或真核细胞表达系统中，由这些表达系统可以生产大量抗原。而且生产过程不必接触病原体，也便于标准化生产，成本低廉。多克隆抗体与单克隆抗体利用多克隆抗体进行疾病的诊断，至少有几方面的缺点：①特异性较低②产品质量难于控制③生产过程费时，步骤多且成本较高单克隆抗体是利用细胞融合技术，在体外大量培养融合细胞，由融合细胞产生大量的抗体。由于单克隆抗体只识别某一特定的抗原决定簇，所以它旅游特异性强、成分均一、灵敏度高、产量大和容易标准化生产等优点。因此，明显优于多克隆抗体。单克隆抗体主要过程：1）免疫脾细胞的制备2）骨髓瘤细胞的培养与筛选3）细胞融合4）阳性克隆的筛选5）克隆化6）细胞的冻存与复苏7）大规模单克隆抗体的制备单克隆抗体虽然主要用于病原体感染的体外诊断，但其应用远不仅于此，其应用范围相当广泛，包括：1)鉴定微生物原体。2)确定激素水平。3)检测肿瘤相关蛋白质。4)检验血液中的药物5)肿瘤检测6)其他领域的应用。二.DNA诊断技术DNA探针杂交技术基因探针：将已知序列的特定基因用同位素、荧光素或酶进行标记，制备成一种诊断试剂。由于基因探针在适当条件下可与同源序列互补形成杂交体，因此，使基因探针与待检组织细胞内的基因片段发生杂交反应，通过探针上的标记观察探针是否与标本DNA结合，从而可判断标本DNA中是否有与探针一致的片段，最终对标本是否有遗传疾病或是否被某种微生物感染做出诊断。PCR技术PCR-RFLP技术PCR-ASO技术利用这两种探针分别于膜上的PCR产物进行杂交。突变了的基因只能与突变的寡核苷酸杂交，而正常的基因只能与正常的个核苷酸探针杂交，通过放射自显影技术便可判断杂交的结果，从而判断基因的突变与否。PCR-ELISA技术PCR-SSCP技术PCR-DGGE技术LCR技术THANKS!传统的传染病诊断技术:一是根据临床症状判断，但这必须要求被感染者发病，根据病状进行判断，况且有些疾病临床表现非常相似，不具有典型性状，容易造成误诊！2.常用的ELISA诊断技术单克隆抗体主要过程：1）免疫脾细胞的制备2）骨髓瘤细胞的培养与筛选3）细胞融合4）阳性克隆的筛选5）克隆化6）细胞的冻存与复苏7）大规模单克隆抗体的制备PCR-SSCP技术LCR技术