肿瘤转移专题知识讲座第一部分肿瘤的生长方式和生长速度大多数良性肿瘤呈膨胀性生长。常有纤维性包膜，容易手术切除，切除后不复发。但血管瘤是一个例外，不呈膨胀性生长，而呈浸润性生长。恶性肿瘤常呈浸润性生长。肿瘤无包膜形成，境界不清。局部切除后，常有肿瘤残留，容易复发。浸润是恶性肿瘤的标志之一。良性肿瘤、恶性肿瘤都可以有这种生长方式。良性肿瘤基底部无浸润，而恶性肿瘤则伴有基底浸润。二、肿瘤的生长速度2、倍增时间：即肿瘤细胞增加一倍所需要的时间3、生长分数（增殖指数）：即处于增殖状态（S、G2、M）的细胞比例生长最旺盛的肿瘤增殖指数也仅有20%左右。4、肿瘤细胞的生成与丢失增多=生成-丢失丢失：凋亡、坏死5、血管生成（Angiogenesis)恶性肿瘤由于生长快，但血管形成慢，造成供血不足，常易发生坏死、溃疡、出血等继发性改变。第二部分肿瘤的扩散一、直接蔓延二、转移(Metastasis)转移是恶性肿瘤最本质的表现。良性肿瘤不转移，只有恶性肿瘤才发生转移。恶性肿瘤中，只有少数肿瘤不发生或很少发生转移，如皮肤的基底细胞癌、脑的恶性胶质细胞瘤。应当指出，浸润是转移的基础。1.淋巴道转移：瘤细胞侵入淋巴管，随淋巴液进入局部淋巴结，先聚集在边缘窦，逐渐累及破坏整个淋巴结，并可进一步转移到下一站引流淋巴结，最终经胸导管进入体循环。受累的淋巴结肿大、变硬、互相粘连成团，切面灰白而干燥。2.血道转移：肿瘤侵入血管，随血流运行，到达远隔器官。肿瘤栓子进入门静脉引起肝转移；进入体静脉引起肺转移；进入肺静脉引起全身性转移；进入胸、腰、盆腔静脉，可通过吻合支，进入脊椎静脉丛引起脊椎、脑转移。3.种植性转移：4.接触转移：（二）浸润转移的机制1、浸润的机制3）消化基底膜和细胞外基质（ExtracellularMatrix):肿瘤/间质细胞分泌酶：IV型胶原酶（金属蛋白酶，Metalloproteinase[MP]）等消化基底膜、间质的胶原、糖蛋白、蛋白多糖4）肿瘤细胞移动（Migration):阿米巴运动：自主、趋化2、转移的机制4）入血循环：大部分被清除、血小板粘附、瘤栓5）附着血管壁/栓塞6）穿过血管壁：消化、移动7）血管生成：转移瘤形成3、抑制浸润可抑制转移增加E-cadherin的表达金属蛋白酶(MP)抑制因子：TissueInhibitorofMetalloproteinase(TIMP)消化抑制4、抑制血管生成也可以抑制转移因为血管生成是转移瘤形成和生长的关键因素之一第三部分肿瘤的分级与分期一、肿瘤的分级分化、异型性、间变、浸润/转移能力二、肿瘤的分期N：LymphNode，表示淋巴结转移的情况。第四部分肿瘤的微转移一、前言血液循环中肿瘤细胞的检测有2个问题需要解决：①寻找特异性高的肿瘤标志物；②建立灵敏度高的实验方法。2肿瘤细胞血行转移的原理3外周血中检测微量肿瘤细胞面临的难题4免疫磁珠技术免疫磁珠（Immunomagneticbeads,IMB）是包被有单克隆抗体的磁性微粒。分离富集——骨髓细胞、血液细胞、肿瘤细胞核酸细菌抗CD-45免疫磁珠阴性去除白细胞Ber-EP4免疫磁珠阳性富集上皮性癌细胞用RT-PCR技术检测肿瘤细胞逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）——优点：敏感性高、特异性强的使检测外周血中的少量癌细胞成为可能。单独使用RT-PCR检测外周血肿瘤细胞的方法具有一定的假阳性率。如：以CK19基因作为上皮性肿瘤标志物的假阳性率高达50%。二、材料与方法免疫磁珠富集后，癌细胞的检测方法——荧光定量RT-PCR检测以下2个基因的mRNA：β2微球蛋白（β2mircoglobulin,β2M）癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）相对CEAmRNA值=Cp(CEA)/Cp(β2M)Cp:Crossingpoint扩增产物开始对数增加点三、结果CD45免疫磁珠与白细胞结合400阳性免疫磁珠与癌细胞结合HE1000CEAmRNA的实时定量RT-PCR检测CEAmRNART-PCR扩增产物的其解曲线分析2MmRNA的Cp值与细胞数的相关性正常人血中加入MGC-803胃癌细胞后相对CEAmRNA的定量检测结果41例胃癌病例CEAmRNA的检测结果阳性病例与临床分期的关系实验结果——免疫磁珠富集结肠癌细胞实验结果——实时定量RT-PCR检测特异性mRNAResultsofamplifyingCK20mRNAinrecoveryexperiment.(A)Firstly,differentconcentrationsofLS174Tcoloncancercellswerespiked