ChineseJournalofNewDrugs2002,Vol.11No.3中国新药杂志2002年第11卷第3期不同标准品对HPGPC法测定多糖相对分子质量的影响3吕志华,于广利,赵峡,徐家敏(青岛海洋大学海洋药物与食品研究所,青岛266003)[摘要]目的:考察不同标准品对高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定多糖相对分子质量的影响。方法:分别采用葡聚糖和肝素为标准品测定低分子海洋硫酸多糖药物CCS的相对分子质量及其分布。结果:以葡聚糖和肝素为标准品测定的CCS的重均相对分子质量分别为20278和7990,分布宽度分别为1.35和1.44。结论:不同标准品对HPGPC法测定多糖相对分子质量结果影响较大。[关键词]高效凝胶渗透色谱法;低分子海洋硫酸多糖;相对分子质量[中图分类号]R931.77;R927.2[文献标识码]B[文章编号]1003-3734(2002)03-0220-02TheinfluenceofstandardsonHPGPCdeterminingthemolecularweightofapolysaccharideLBZhi2hua,YUGuang2li,ZHAOXia,XUJia2min(InstituteofFoodsandDrugs,OceanUniversityofQingdao,Qingdao266003,China)[Abstract]Objective:TotesttheinfluenceofreferencestandardsonHPGPC(highperformancegelpermeationchromatography)determiningthemolecularweight(MW)ofaploysaccharide.Meth2ods:IndeterminingtheMWandMWdistributionoflowMWmarinesulfatedpolysaccharideCCSbyHPGPC,dextranandheparinwereadoptedasreferencestandards.Results:TheMWandMWdistribu2tionofCCSobtainedbyuseofdextranasreferencestandardwere20278and1.35respectivelyandthatbyuseofheparinasreferencestandardwere7990and1.44respectively.Conclusion:TheMWofCCSobtainedbyHPGPCmethodisgreatlydifferedwithdifferentstandards.[Keywords]HighPerformanceGelPermeationChromatogrophy;lowmolecularweightmarinesulfatedpolysaccharide;molecularweight多糖是自然界中广泛存在的一类生物大分子,材料与方法是具有多分散性的聚合物,大量研究表明多糖具有1仪器与试药多种药理活性[1,2],如抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、抗氧高效液相色谱仪:美国Waters公司515型液相化等活性。多糖的药理活性与其相对分子质量色谱仪,2410示差折光检测器,GPC软件。(MW)及其分布密切相关,中华人民共和国药典已系列标准葡聚糖(Dextran,Phenomenex产品),将MW及其分布列入多糖药物的质量标准[3]。以MW分别为1200,3650,5700,11700,25500;系海洋甲壳质为原料,经分子修饰而制得的低分子海列标准肝素(由美国爱荷华大学Dr.Linhardt实验洋硫酸多糖药物CCS,经药理学研究表明其具有明室提供),MW分别为665,1330,1995,2660,显的降血脂和促进内皮细胞生长的作用。由于高效7500;无水硫酸钠为分析纯试剂。CCS(本所提供,凝胶渗透色谱法(HPGPC)具有快速、重现性好等优批号:20000520,20000521,20000522)。点,被广泛应用于多糖MW及MW分布的测定[4]。2色谱条件为了考察相对分子质量不同的标准品对测定结果的色谱柱:日本TOSOH公司TSKgelG3000影响,本研究分别采用葡聚糖和低分子肝素作标准PWXL凝胶色谱柱(300mm×7.8mm),流动相:0.7%品,测定了CCS的MW及其分布,并对测定结果进NaSO水溶液;流速:0.5mL·min-1;柱温:35℃;进行了比较。24样量:20μL。3基金项目:国家863项目资助(819-07-03)—022—