浅谈干细胞研究美国生物学家戴利讲过一句名言：20世纪是药物治疗的时代！！美国《Science》杂志1999年—将“干细胞研究的新发现”列入十大科技进展之首。2000年—再次入选年度十大科技进展。2002年—列入值得关注的六大科技领域之一。我国有关干细胞的研究也十分活跃，已有多个有关干细胞的“973”项目，召开过多次全国性或国际性学术会议，出版过多本专（译）著。“863”计划近期将为干细胞研究提供2亿元人民币的经费。干细胞的概念干细胞的分类及特点干细胞的研究进展干细胞研究的技术方法干细胞的应用前景干细胞研究中存在的问题一、干细胞的概念按分化潜能分类:全能干细胞(Totipotentstemcell):它具有形成完整个体的分化潜能。如受精卵，胚胎干细胞。多能干细胞(pluripotentstemcell):具有分化出多种组织细胞的潜能，但却失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制。如骨髓多能造血干细胞。专能干细胞(multipotentstemcell):这类干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化，如上皮组织基底层干细胞、肌肉中的成肌细胞等。根据来源分类:来源于胚胎---胚胎干细胞（EmbryonicStemCell，ESC）胚胎生殖细胞（EmbryonicGermCell，EGC）来源于成体---成体干细胞（Adult-derivedStemCell，ASC）胚胎干细胞（embryonicstemcells,ESC）胚胎干细胞（embryonicstemcells,ES细胞）胚胎生殖细胞（embryonicgermcells,EG细胞）成体干细胞（Adult-derivedstemcells,ASC）成体干细胞种类造血干细胞间充质干细胞（MesenchymalStemCell，MSC）成体干细胞的特点成体干细胞横向分化成体干细胞横向分化干细胞优缺点比较1981：M.J.Evans等体外培养老鼠的胚胎干细胞；ElizabethCarr成为美国的第一个试管宝宝。1995～1996：恒河猴胚胎干细胞，在体外培养分化成三种胚层。1998：JamesThomson从体外受精卵取得人类胚胎干细胞，并能稳定地在体外培养；J.Gearhart从胎儿卵巢或睪丸组织，得到一种具有干细胞特性的原始生殖细胞，称为人类生殖干细胞。1999：Science杂志公布干细胞为世界十大科技进展榜首。从小鼠肌肉组织取得的成体干细胞可以横向分化为血液细胞。此后，科学家相继证实成体干细胞具有可塑性。2000年：美国总统克林顿宣布美国政府准许用政府经费进行人胚胎干细胞研究。科学家成功分离出人类胚胎干细胞并使其在体外分化。2001年：美国总统布什宣布联邦政府将有限资助胚胎干细胞研究。2002年：Nature评选「干细胞的争议」为本年度科学界重大新闻。2003年:美国卫生独立研究院（NIH）施松涛等人首次发现牙齿间质存在干细胞。2005年:干细胞研究领域学术丑闻：韩国汉城大学黄禹锡干细胞研究论文造假.2006年:日本科学家山中亚弥等成功诱导出鼠iPS，将干细胞研究扩充到一新领域。2007年:山中亚弥等人和汤姆森宣布成功利用人类上皮细胞诱导出iPS细胞。2008年:美国科学家宣布在不伤害胚胎的前提下成功获取胚胎干细胞。并解析了microRNAs在干细胞发育及分化中的调控作用.2009年:汤姆森利用皮肤细胞培养的iPS重分化为神经细胞，并在试管内成功再现神经细胞死亡过程。德国科学家首次利用单基因调控方法成功诱导iPS。2009年:美国白头研究所科学家巧妙的将诱导iPS时带入细胞的基因去除，大大降低了细胞癌变风险。汤姆森和俞君英等利用质粒为诱导iPS基因载体诱导iPS，随着细胞分裂丢失质粒，可得到纯净无外源DNA的iPS，在iPS应用安全性方面又进一步。我国干细胞研究主要集中在中科院和几大高校.上海生科院:肖磊;北京大学:邓宏魁、李凌松;复旦大学:朱剑虹；中科院动物所：周琪；上海交大遗传所：曾凡一；陕西干细胞研究中心：窦忠英。干细胞的分离培养分离、纯化干细胞的鉴定生物学特性鉴定体外分化潜能鉴定体内分化潜能鉴定嵌合体及核移植动物干细胞的体外诱导分化干细胞的分离、纯化（1）流式细胞仪分离法（2）显微外科法（3）酶解法：蛋白酶消化组织，经过差速贴壁、单克隆培养、连续传代培养等方法进行分离、纯化。组织蛋白酶：胰蛋白酶、胶原酶等。（4）免疫磁珠法：磁珠包被特异性抗体，通过抗原抗体反应进行分离纯化。ESC的分化抑制培养（1）细胞形态特征（2）细胞表面的特殊标志（3）细胞内干细胞标志基因的表达（4）核型分析