兰州地区人乳头瘤病毒16型E6、E7基因的克隆及表达的中期报告.docx
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兰州地区人乳头瘤病毒16型E6、E7基因的克隆及表达的中期报告本研究旨在克隆并表达兰州地区流行的HPV16型E6、E7基因,初步探究其对宿主细胞增殖和凋亡的影响。我们采用PCR方法从兰州地区患者的宫颈癌组织中扩增出E6、E7基因,并酶切后克隆到表达载体中。经过测序确认后,我们将表达载体转染至宫颈癌细胞株HeLa中,并采用Westernblot和实时荧光定量PCR等方法进行基因表达的检测和分析。初步结果显示,我们成功克隆出了经过酶切的HPV16型E6、E7基因,并在HeLa细胞中成功表达。Westernblot结果显示,E6、E7蛋白在转染组织中表达的水平明显高于对照组,且表达水平呈时间相关性增加。实时荧光定量PCR结果也表明,E6、E7基因的转录水平在转染组织中明显高于对照组。进一步细胞增殖实验和细胞凋亡实验的结果表明,E6、E7基因对HeLa细胞的增殖和凋亡均有明显的促进作用。本研究初步证实了兰州地区流行的HPV16型E6、E7基因对宿主细胞增殖和凋亡具有促进作用,为进一步研究HPV16型与宫颈癌的关系提供了实验依据。
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