兴奋剂检测.ppt
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3合成类固醇及β2激动剂这类药物共27种。合成类固醇又称为甾体同化激素,是雄性激素衍生物。这类药物有增长肌肉的作用,为很多运动员口服或注射使用,但副作用也很严重,会干扰人体的自然激素平衡,男人服用后会发生抑制雄性激素分泌,睾丸缩小,胸部扩大,早秃等现象;女人服用后,会发生男性化,肌肉增生,月经失调,毛发增多等现象。有些作用还是不可逆的。过多地使用这类药物还会引起严重的肝、肾损伤、并发肝癌及心脏病症等。这类药物中的睾酮是人类自然分泌的一种激素,所以规定要测定睾酮与其异构体表睾酮之比值,大于6时可判断为使用了此类药物。另有几种β2激动剂,据认为也有类似作用。4β-阻断剂这类药物共有12种。原为降低血压和降低心率的药物,但同时具有镇静作用。对于射击、射箭等项目的运动员,稳定神经,提高成绩。7肽类激素共4种。都是内源性激素,使用后或可起到雄性激素作用,或可增加身体耐力,因而也被禁用。禁用药物出去上述这些品种外,还包括结构和性质与这些药物相似的物质,所以实际禁用的药物决不限于已列出的这些,会大大超过这个数目。这些类似的药物都作为“有关化合物”,也是禁用的,是为了防止运动员取巧,服用新发明的某些药物。三、检测手续兴奋剂检测都是通过尿样分析来进行的。被检查的运动员一般是获得了名次的,对未获名次的则是随机选择。比赛结束后一小时内,被选中的运动员需去取样站报到,有专人伴随左右,直至取得尿样为止。一般需取尿样至少75ml,分装两个瓶内,一瓶装约50ml,称为A样,另一瓶装25ml称为B样。将A样和B样密封、编号,再装入一个袋中,密封,冷冻保存,送往检测中心分析。在分析时,先用A样进行,应在24小时内取得结果,如查出尿样中有禁用药物,则由检测中心通知组织委员会,再通知运动员及其所在体育队队长、队医。大家会同当面去出B样再进行分析复审,如仍检测出有禁用药物,则由医学委员会讨论决定采取措施。由于服用药物影响运动员的声誉,所以检测工作要求极严格,并采取严密的报案措施,以防止各种弄虚作假的欺骗行为。四、检测实验室的资格对检测兴奋剂的实验室,国际奥委会有一套规定的申请手续与方法,经测试合格后,才有资格进行这项工作,其所发出的分析结果报告才被认为有效。现在的规定是:如欲承担某国际性比赛的兴奋剂检测,必须再比赛前一年通过正式考试,而再参加正式考试前的半年至一年内,要先通过3次预考试。每次考试须分析10个未知尿样,并在24小时内得到正确结果。如有一个不正确,须重新补做2个未知样品并得到正确结果。如只做对7个考试尿样,则作不及格论,须过一年后再行申请考试。考试合格的实验室的有效工作期限为一年,翌年初须进行复核。复核时要分析8个未知尿样,并得出正确结果,如有一个不正确,须重新补做2个未知样品并得到正确结果。如上所述,如复核不能通过,则该实验室的检测资格即被取消。国际奥委会医学委员会对申请兴奋剂测试资格考试的实验室首先要对其人员组成、业务能力、过去成就、实验室设备、所用兴奋剂标准品、禁用药物阳性尿、原型药物和必要的代谢物的气相色谱和质谱数据等等进行审查,认为合格后才同意其申请。教困难的是标准品的收集和阳性尿的取得,因为禁用药物是世界各地生产的、需通过多种渠道才能收集完全;有些药物还需要特殊许可才可携带或运输邮寄。阳性尿的取得则要有自愿服用这些药物的人按时收集尿液,作为检测时的对照标准品、阳性尿和空白尿的色谱和质谱图谱,共同对照比较。当尿样与标准品和阳性尿的数据完全相同时才可确证。五、检测步骤尿样由专人送至检测实验室后,需登记、编号,并测量某些基本数据,如pH、比重、颜色、体积及有无沉淀等。然后将尿样分取数份,按组进行筛选,若筛选中查出有违禁药物,则需进一步确证其存在。色谱方法是理想的检测手段。1967年报到的刺激剂系统检测方法分为三步:第二、三步为确证。用两种提取方法以气相色谱法(GC)、薄层色谱法(TLC)进行分离鉴定,使用了4种GC填充柱系统,氢焰离子化检测器,可检出40种兴奋剂。其后随着色谱技术的发展及禁用药物的增加,检测方法也相应地不断改进。1972年采用了程序升温方法,并用氮磷检测器检测。1976年使用气相色谱-质谱联用手段检测甾体,1980年开始用毛细管气相色谱法检测,至1984年大体基本定型,并增加了用高效液相色法检查几种特定药物及咖啡因定量等工作。1988年增加了2类药物,β-阻断剂多用气相色谱法检出,利尿剂则用高效液相色谱法检测。目前一般按兴奋剂类别分为4组或5组进行。各实验室所用方法的原理大同小异,具体试验条件则根据自己的具体情况而有所不同。检测的第一步是筛选,如未查出任何禁用药物即作为阴性尿,不再考虑;如查出有禁用药物存在,则仍需进一步分析,称为“确证”。现以第十一届亚运会所用的检测方法为例说明如下:1筛选方法尿样