第三节制造生物制品的条件一、基本条件1、相应的厂房和动物舍2、相应的生产设备3、一定比例的专业技术人员，包括能掌握生产技术和实验技术的专业人员。4、具有防止散毒的设施和隔离条件，具有良好的卫生环境。二、生物制品生产的申报与审批1、实验室实验2、田间实验3、中间实验4、区域实验5、申报第四节我国兽医生物制品事业的慨况与成就★1951年，成立了兽医生物制品监察所（1982年改名中国兽药监察所）。★猪瘟兔化弱毒苗属世界领先地位，★马传贫弱毒苗、牛瘟疫苗、鸭瘟疫苗、小鹅瘟疫苗、仔猪副伤寒苗属国际水平。★与发达国家相比仍有许多不足。一、生物制品菌、毒种的概念与分类凡应用于生物制品生产、鉴定和研究的细菌菌种、病毒毒种以及分类地位在原虫以下的生物种都属于生物制品的菌种和毒种范围。按用途分类：1、生产用菌、毒种，A、直接生产用B、免疫用C、加工用2、鉴定用菌、毒种，4、标准菌株（参考菌株）二、生物制品菌毒种的一般要求1、来源（历史）清楚，资料完整由中监所或中监所委托分管的单位负责供应2、生物学特性比较典型菌、毒种的形态特征，培养特性，对动物的病原性特点，引起细胞病变的特征生物化学、免疫学及血清学特性3、血清型相符与疫苗使用区的流行病原相符4、遗传性状稳定保存、传代、使用过程中受各种因素影响容易变异三、菌种鉴定（一）毒力鉴定«规程»规定有具体标准（二）免疫原性鉴定攻毒保护试验（三）稳定性试验毒力是否稳定、是否反强四、毒种鉴定强毒毒种和弱毒毒种要根据各自的特性制订相应的标准。五、菌毒种的保存避免变异真空冷冻干燥（冻干），冻干的菌种4℃，毒种-20℃以下.第三章细菌培养第二节培养基的主要成分与功用一、肉浸汁二、蛋白胨三、明胶四、琼脂五、酵母浸汁第三节培养基的种类与用途天然培养基合成培养基固体培养基液体培养基半固体培养基选择培养基：根据某一种类微生物的特殊营养要求或对某些物理、化学因素的抗性设计的一类培养基。鉴别培养基：含有特定指示剂的培养基。第四节培养基的制备程序第五节常用培养基第六节细菌的繁殖一、细菌群体的繁殖规律（一）迟缓期原因、特点（二）对数期原因、特点（三）稳定期原因、特点（四）衰亡期原因、特点二、影响细菌繁殖的因素第七节大量生产细菌培养方法第四章病毒培养第一节动物培养三.接种后动物的饲养管理和收获病毒在有良好隔离装置场地饲养不同组分开饲养接种动物出现典型症状者才能收获病毒第二节鸡胚培养二、鸡胚接种：1.绒毛尿囊膜接种2.尿囊腔接种3.卵黄囊接种4.羊膜腔接种5.静脉、脑内接种三、收获鸡胚放4C下过夜，消毒蛋壳包括组织块培养、器官培养和细胞培养。一般指细胞培养原代细胞：用新鲜组织制备。二倍体细胞：含双倍的染色体，能传50-100代。传代细胞：能够在体外无限传代的细胞。培养液：基础培养液，有RPMI-1640、MEM等生长液：加5-10%小牛血清维持液：加1-2%血清影响细胞生长的因素1．温度37℃2．pH值7.0-7.46.8-7.63．气体O2、CO24．细胞接种量5．无菌条件单细胞的制备细胞培养关键：1、细胞的冻存与复苏用DMSO做保护剂用慢冻快融法2、细胞培养污染控制细菌污染、支原体污染、病毒污染五.细胞培养法第四节培养基的制备程序第五节常用培养基第六节细菌的繁殖一、细菌群体的繁殖规律（一）迟缓期原因、特点（二）对数期原因、特点（三）稳定期原因、特点（四）衰亡期原因、特点第一节动物培养第二节鸡胚培养