核酸的合成.doc
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核酸的生物合成第一节DNA的生物合成第二节RNA的生物合成第三节基因工程的简介DNA是生物遗传的主要物质基础,生物机体的遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺序,并通过DNA的复制由亲代传递给子代。在后代的生长发育过程中,遗传信息自DNA转录给RNA然后翻译成特异的蛋白质,以执行各种生命功能,使后代表现出与亲代相似的遗传性状。1958年,遗传信息的中心法则单向传递转录翻译DNARNA蛋白质逆转录复制病毒(复制)1964-1970劳氏肉瘤病毒的遗传方式,致癌RNA病毒发现Reversetranscription中心法则复制DNA转录逆转录RNA蛋白质翻译复制中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律,揭示遗传的分子基础,不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生命现象有了更深刻的认识,而且以这方面的理论和技术为基础发展了基因工程,给人类的生产和生活带来了深刻的革命。中心法则的遗传流向有5条途径1、DNA→DNA:DNA复制(以DNA为模板合成DNA)2、RNA→RNA:RNA复制(以RNA为模板合成RNA)3、DNA→RNA:DNA转录(以DNA为模板合成RNA)4、RNA→DNA:反逆转录(以RNA为模板合成DNA)5、RNA→Protein:翻译复制:亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下,生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。转录:以DNA为模板,按照碱基配对原则将其所含的遗传信息传给RNA,形成一条与DNA链互补的RNA的过程。翻译以mRNA为模板,将mRNA的密码解读成蛋白质的AA顺序的过程。逆转录:以RNA为模板,在逆转录酶的作用下,生成DNA的过程。第一节DNA的生物合成一、DNA的半保留复制二、与DNA复制有关的酶和蛋白质三、DNA的复制过程四、逆转录五、DNA的损伤修复回顾DNA的结构特点:真核细胞染色体DNA双链线状噬菌体T2,T5,T7,λ,P22E-Coli染色体DNA线粒体DNA双链环状叶绿体DNADNA多瘤病毒DNA,病毒SV40DNA噬菌体λ和φX174的复制型单链线状:动物病毒MVM单链环状:噬菌体φX174一、DNA的半保留复制TAATATATAGTGCGCGCGCGCGCTCGCGCGCTAAATATATAATCTATATATCGTGCGCGCGTAGATATATAGCCGCGCGCCGCGCGCGCGCGCGCGATATATATCGCGCGCGTATATATAGCGCGCGCGCGCGCGC母链DNA复制子代DNADNA的半保留复制实验依据1958年Meselsonstahl用同位素示踪标记和密度梯度离心技术实验证明了DNA是采取半保留的方式进行复制.实验设计思路:1.E.coli能够以NH4为氮源合成细胞的含氮物质,核酸里的氮原子….也将来自NH42.如果使用15N同位素标记的NH4,…..那么15N也会进入核酸3.含15N的核酸将比普通核酸(14N)的密度…..大,可在密度梯度离心中将其分开2.密度梯度实验梯度离心结果含重氮-DNA的细菌培养于普通培养液第一代继续培养于普通培养液第二代——实验结果支持半保留复制的设想。半保留复制定义由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制。(semiconservativereplication)DNA的半保留复制的生物学意义:DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性,保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。碱基互补配DNA这种复制的稳定性,依靠?对和DNA聚合酶对碱基的正确选择和校对。二、与DNA复制有关的酶和蛋白质聚合反应示意图反应式:dNMPndNTP→dNMPn1PPi原料:四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dGTP、dCTP、dTTP模板:以DNA的两条链为模板链,合成子代DNA。模板的利用方向是3‘-5’。引物:一小段RNA或DNA)为引物,在大肠杆菌中,DNA的合成需要一段RNA链作为引物。催化因子:?