青紫薯色素安全性评价.docx
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青紫薯色素安全性评价青紫薯色素安全性评价毕业论文是每一个大学生都需要去完成的一项任务,这也是你能够拿到学位证书的重要一点。下面小编给大家提供药学毕业论文范文一篇,欢迎阅读!【摘要】目的对青紫薯色素安全性进行评价。方法采用最大给药量试验,小鼠每天3次、每次36mL/kg灌胃给予200g/L的青紫薯色素水溶液14d,观察其体质量变化和死亡情况;以仓鼠肺成纤维细胞(CHL)行染色体畸变试验,对青紫薯色素进行毒理学评价。结果小鼠灌胃给予21.6g/(kg·d)青紫薯色素后未出现毒性反应,也无动物死亡,体质量增长良好;CHL染色体畸变试验呈阴性,染色体畸变率在正常范围内。结论青紫薯色素灌胃给药21.6g/(kg·d)未出现急性毒性反应,青紫薯色素在1.00g/L剂量下无致突变作用。【关键词】色素类甘薯急性毒性试验染色体畸变甘薯是一种耐寒、耐贫瘠、适应性广、污染少、易栽培的粮食作物[1]。国内外研究结果显示,甘薯具有抗氧化、抗突变、抗肿瘤、增强记忆等多种生理功能[2~4]。青紫心甘薯是紫甘薯的改良品种,青紫薯色素由青紫心甘薯采用酸性溶剂萃取法制备而来。青紫薯色素是一种含原花青素的物质,研究证实,它可以抑制氧化应激对组织细胞的损伤,可有效清除超氧阴离子自由基、羟基自由基、过氧化亚硝基自由基和脂类自由基,保护小鼠抗60Coγ?射线辐射所致的氧化损伤,减少氧自由基的产生,抑制脂质过氧化,抑制肿瘤细胞形成等[5,6]。同时,还具有抗Fe2+引发的卵磷脂脂质体过氧化、抑制H2O2引发的红细胞溶血作用的能力[7]。本研究应用最大给药量试验及中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验,对青紫薯色素进行安全性评价,为拓宽甘薯应用领域及开发系列产品提供基础实验依据。1材料与方法1.1材料青紫薯色素冻干粉,由青岛市农技站提供,批号为20031129?2,溶于水,配制成200g/L青紫薯色素水溶液。选择昆明种小鼠60只,由河南省实验动物中心提供,雌雄各半,体质量为21~23g。CHL细胞为置于-80℃或液氮冻存样品。丝裂霉素C(MMC)、环磷酰胺(CTX),山西泰盛制药有限公司生产。肝微粒体酶(S9)按常规方法制备。1.2方法1.2.1最大给药量试验[8]经预试验后,选健康小鼠40只,体质量21~23g,雌雄各半。随机分为生理盐水对照组和青紫薯色素组。禁食2h后,青紫薯色素组小鼠灌胃给予200g/L青紫薯色素水溶液,每次36mL/kg,每天3次,间隔6h,共21.6g/(kg·d);空白对照组给予等量生理盐水。两组均连续给药14d,观察小鼠的活动状态、饮食情况、粪便、呼吸,记录体质量变化及死亡情况。1.2.2染色体畸变试验以CHL细胞进行加与不加S9的染色体畸变试验。阳性对照为不加S9的MMC(0.1mg/L),加S9的CTX(20mg/L)。设青紫薯色素1.00、0.50、0.25g/L等3个剂量组,以生理盐水作为阴性对照组。每个测试组采用2个平行培养瓶。将5×104个CHL细胞接种于50mL培养瓶中,培养72h后,加入受试物。不加S9时,受试物与细胞作用24h及48h后,分别收获细胞制片。而加S9时,受试物、S9混合液与细胞共同作用6h后,将液体弃去,用PBS洗涤细胞3次,加入新培养液继续培养24h后,收获细胞制片。常规制片,GIEMA染色。每一试验组每瓶选择100个分散良好的中期分裂相,在油镜下观察染色体有无断裂、缺失、易位、互换、环、多倍体等染色体畸变。1.3统计学处理结果用±s表示,用SPSS统计软件对数据进行处理,数据间比较采用t检验。2结果2.1最大给药量试验小鼠灌服药物14d内,青紫薯色素组未出现毒性反应,体质量增加,与生理盐水对照组相比,差异无显著性(P>0.05),见表1。其外观、行为活动、精神状态、饮食、大小便及呼吸等均正常,无动物死亡。表1青紫薯色素灌胃给药对小鼠体质量的影响(略)2.2染色体畸变情况不加S9青紫薯色素各剂量组CHL细胞染色体的畸变率为1%~3%,其畸变类型为断裂和缺失,无明显浓度依赖性;阴性对照组染色体畸变率2%,畸变类型为微小体和断裂;而阳性对照组(MMC0.1mg/L)染色体畸变率26%,畸变类型以断裂、断片、缺失、微小体为主。加S9青紫薯色素各剂量组CHL细胞染色体畸变率均为2%,畸变类型有断裂、缺失、微小体;阴性对照组染色体畸变率1%,畸变类型为交换;阳性对照组(CTX20mg/L)的畸变率为27%,畸变类型以断裂、断片、微小体为主。无论是加S9组还是不加S9组,24h还是48h收获细胞,不同剂量青紫薯色素组畸变率均<5%,根据CHL细胞染色体畸变结果判定标准,畸变率在正常范