遵义医学院医学与科技学院机能学实验学生设计性实验申请表实验名称不同时间给予绿茶多酚对大鼠急性酒精性肝损伤影响年级2012班级K-4班专业临床申请学生姓名及学号杜红会（1220150435）曾静（1220150434）齐小雄（1220150436）实验小组组别第五组所在实验室第三实验室指导教师邓媛媛金凤填表日期2014年11月16立项背景（研究现状、趋势、研究意义等）随着人们生活水平的提高，酒的消费量逐年的增多，酒精性肝损伤也越来越引起人们高度的重视。肝脏是重要的物质代谢器官，是酒精在体内代谢的主要场所，也是酒精作用的主要靶器官之一[1]。酒的主要成分是乙醇，适度的饮酒能够消除疲劳，扩张血管，使脑血流增加，刺激中枢神经兴奋，加快血液循环。但过量饮酒则会给机体带来许多危害[2]。如酒精性肝病（Alcoholicliverdisease，ALD），是由于长期大量饮酒所致的肝脏疾病。在病理组织学上按照肝细胞发生脂肪病变的程度分为：酒精性脂肪肝（Alcoholicfatty，AF）、酒精性肝炎（Alcoholichepatitis，AH）、酒精性肝纤维化（Alcoholichepaticfibrosis）及酒精性肝硬化（AlcoholicHepaticcirrhosis），四者是渐进性的过程，亦可不同类型同时存在[3]。我国由酒精所致肝损害的发病率呈逐年上升趋势，调查亦显示酒精性肝病在人群中属多发病和常见病不容忽视。酒精在体内经肝脏代谢后，产生的一些代谢产物直接影响体内正常的糖代谢途径，从而产生氧自由基，引起肝细胞损伤，甚至肝细胞坏死、肝纤维化和肝硬化[4,5]。大量乙醇进入机体后，在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧化，使三羧酸循环产生障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢[6]。乙醇可致磷酸甘油增多而促进甘油三酯合成，致使脂肪在肝细胞内沉积，同时乙醇能激活氧分子，产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化及体内还原型谷胱甘肽的耗竭，同时乙醇中毒可以直接引起肝脏纤维化[7]。丙二醛（MDA）是脂质过氧化反应的终产物，MDA含量也可以间接反映机体细胞受自由基攻击的程度，MDA的增加表明组织细胞脂质过氧化物量的增加。总巯基的含量也与酒精性肝病的发生、发展有着密切的联系。血清转氨酶活性被认为是肝细胞损伤的敏感指标。谷丙转氨酶（ALT）主要分布于肝脏、肾脏和肌肉，血清中的ALT主要来自胞浆，当肝脏受损时，此酶可释放入血，导致血中酶活性浓度增加，血清中ALT活性的升高在一定程度上反映了肝细胞受损伤的程度[8]。茶多酚是从茶叶中提取的有效成分之一，由多种酚性物质组成，是一种多酚类化合物，具有清除自由基和抗氧化等生物活性作用[9]。茶多酚（TeaPolyphenols）是HYPERLINK"http://baike.baidu.com/view/3217.htm"茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以黄烷醇类物质（儿茶素）最为重要。茶多酚又称茶鞣或茶HYPERLINK"http://baike.baidu.com/view/68056.htm"单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。有研究发现[10]茶多酚能有效抑制乙醇小鼠的兴奋性，降低其共济失调能力，提高其乙醇半数致死量，提示茶多酚可能具有解酒作用，中国历代医学文献也多处记载茶可以解酒毒。茶多酚有众多的生物学活性，研究表明茶多酚对兔酒精性肝损伤有一定的预防和治疗效果，具有广泛的临床应用价值[11]。也有研究表明茶多酚对酒精性肝损伤具有一定保护作用[12]。从上所述我们能够得到酒精性肝损伤的研究很多，但茶多酚对急性酒精性肝损伤的研究很少，所以我们的实验研究对治疗急性酒精性肝损伤和茶多酚的开发有重要意义。实验动物(包括动物的种类、体重、数量、性别、健康状况、提供单位等要求)健康雄性SD大鼠，50只，体重200g左右，由遵义医学院实验动物中心提供。主要仪器全自动生化分析仪，ThermoScientificVarioskanFlash酶标仪，电子天平，冷冻离心机，解剖器械，生物显微镜等。主要试剂和药品绿茶多酚、血清谷草转氨酶（Aspartateaminotransferase，AST）、谷丙转氨酶（Alanineaminotransferase，ALT）、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、总巯基测定试剂盒。研究方案分组：健康雄性SD大鼠，适应喂养7d后随机分为对照组、乙醇组、绿茶多酚2h给予组（提前组）、绿茶多酚与乙醇同时给予组（同时组）和绿茶多酚推后给予组（推后组），每组10只。建立模型：本试验采用一次性给予酒精的方式建立急性模型。方法：先给予提前组