1．液相色谱分离的原理？正相HPLC与反相HPLC的区别？液相色谱分离的原理：液相色谱分离系统由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。正相HPLC与反相HPLC的区别：、1正相色谱法采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。2反相色谱法一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。3正相色谱法与反相色谱法比较表正相色谱法反相色谱法固定相极性高～中中～低流动相极性低～中中～高组分洗脱次序极性小先洗出极性大先洗出从上表可看出，当极性为中等时正相色谱法与反相色谱法没有明显的界线（如氨基键合固定相）。2．分别介绍GC和HPLC的特点和应用范围？GC常识：气相色谱法有哪些特点？气相色谱是色谱中的一种，就是用气体做为流动相的色谱法，在分离分析方面，具有如下一些特点：１、高灵敏度：可检出１０-１０克的物质，可作超纯气体、高分子单体的痕迹量杂质分析和空气中微量毒物的分析。２、高选择性：可有效地分离性质极为相近的各种同分异构体和各种同位素。３、高效能：可把组分复杂的样品分离成单组分。４、速度快：一般分析、只需几分钟即可完成，有利于指导和控制生产。５、应用范围广：即可分析低含量的气、液体，亦可分析高含量的气、液体，可不受组分含量的限制。６、所需试样量少：一般气体样用几毫升，液体样用几微升或几十微升。７、设备和操作比较简单仪器价格便宜。HPLC有以下特点：高压——压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降压为75Kg/cm2以上。HYPERLINK"http://www.e-dyer.com/search.do?method=searchArticle4Action&word=%B8%DF%CB%D9"\t"_blank"高速——流速为0.1~10.0ml/min。HYPERLINK"http://www.e-dyer.com/search.do?method=searchArticle4Action&word=%B8%DF%D0%A7"\t"_blank"高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。1应用范围不同气相色谱仅能分析在操作温度下能气化而不分解的物质。对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难。致使其应用受到一定程度的限制，据统计只有大约20%的有机物能用气相色谱分析；而液相色谱则不受样品挥发度和热稳定性的限制，它非常适合分子量较大、难气化、不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物及高聚物的分离分析，大约占有机物的70~80%。3．例举3种生物样品预制备的仪器并写出使用方法和注意事项？①组织捣碎匀浆机使用方法及注意事项1．先将刀轴和机轴配合好，后将连接器弹簧性元性向下移动至尺槽内，（向下移足与台阶碰牢）机器才好运转。2．开机之前，必须注意电源与电机上的电压是否相符。3．碳刷经常要检查，如太短要更换新碳刷，如发现碳刷火花不正常应立即停止使用，检查障碍原因，修理好后方可使用，以免整流器和线圈烧坏。4．由于电机转速高，如连续使用会使电机烧坏，因此使用时间以三分钟为限，停止5分钟后方可使用。5．玻璃杯装置时需与机上圆轴心对准，居中，四面无摇动，方可开机。6．本机不宜空转，使用时必须放入少量液体或油脂。7．放入物料时须缓缓加入，先开慢档，后开快档，但慢档只能作起步作用，不宜常用。②旋转蒸发仪使用方法与注意事项使用方法：1.高低调节:手动升降,转动机柱上面手轮,顺转为上升,逆转为下降.电动升降,手触上升键主机上升,手触下降键主机下降.2.冷凝器上有两个外接头是接冷却水用的,一头接进水,另一头接出水,一般接自来水,冷凝水温度越低效果越好.上端口装抽真空接头,接真空泵皮管抽真空用的.3.开机前先将