第三节抗生素的微生物检定法1.稀释法：将等量的试验菌菌液加入到含有不同浓度抗生素的液体培养基中，观察液体培养基中有无细菌生长，所得结果是一种范围而不是绝对值。2.比浊法：将一定量的抗生素加至接种有试验微生物的澄清的营养丰富的液体培养基中，混匀后，在一定温度下培养产生浑浊，浑浊程度与细菌数的增加，细菌群体质量的增加和细菌群体细胞容积的增加之间存在直接的关系，光照射时，吸光度与抗生素浓度符合比尔定律。3.扩散法：（纸片法和管碟法）纸片法：纸片法又称PD法(PaPerDisc)，是以圆滤纸从待测物(如肉类、乳等)取样，与含有枯草杆菌等细菌的营养琼脂贴合，再放入一含有标准抗生素的阳性对照滤纸片，经培养，通过观察抑菌圈大小判定有无抗生素残留。选用的菌种决定了能检出的抗生素种类，如用嗜热脂肪杆菌纸片检测法仅适用于检测p一内酞胺类抗生素，但能暗示是否还存在其它抑菌物质，灵敏度可达0.008IU以下。此法具有广域的灵敏性。管碟法：是琼脂抗散法中的一种，是将不锈钢小管安置在摊布特定试验菌的去哦能够知培养基平板上，当小管内加入抗生素溶液后，抗生素分子就随溶剂向培养基内呈球形抗散。当抗生素在菌层培养基中扩散时，会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度，即扩散中心浓度高而边缘浓度低。因此，当抗生素浓度达到或高于MIC（最低抑制浓度）时，试验菌就被抑制而不能繁殖，从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散定律的推导，抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系。管碟法的理论根据基本设备，主要用具和试验材料灭菌缓冲液菌悬液管碟法的一般操作步骤和操作要点（四）效价测定的方法：二剂量法和三剂量法（五）可靠性检验、效价和可信限计算可靠性检验：采用F检验法—是通过比较两组数据的方差S2，以确定它们的精密度是否有显著性差异的方法，统计量F的定义为两组数据的方差的比值。F小f大分子为大的方差，分母为小的方差。在一定的置信度和自由度时，如果试验结果求得F值大于表中提供的数值，说明两组数据的精密度之间存在显著性差异，反之不存在。三影响测定的因素：试验菌种，培养基，双碟的制备，双碟的培养时间和温度，抗生素污染，标准品。第四节生物制品效力检定二活菌数和活病毒滴度测定1.活菌数测定2.活病毒滴度测定三类毒素和抗毒素的单位测定1.絮状单位测定2.结合单位测定3.抗毒素单位测定四血清学试验五其它有关效力的检定和评价鉴别试验，稳定性试验，人体效果观察。药物检验常用分析方法酶分析法：一种是以酶为分析对象即酶活力测定法；另外一种是以酶为分析工具的分析方法，分析的对象可以是酶的底物，辅酶活化剂以及酶的抑制剂。优点：专一性和灵敏性，操作简单。电泳分析法：在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同，可实现分离。高效毛细管电泳的特点：1.仪器简单、易自动化电源、毛细管、检测器、溶液瓶2.分析速度快、分离效率高在3.1min内分离36种无机及有机阴离子，4.1min内分离了24种阳离子；分离柱效：105～107/m理论塔板数；3.操作方便、消耗少进样量极少，水介质中进行；4.应用范围极广有机物、无机物、生物、中性分子；生物大分子等；分子生物学、医学、药学、化学、环境保护、材料等高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。免疫分析法是基于抗体与抗原或半抗原之间的高选择性反应而建立起来的一种生物化学分析方法，具有很高的选择性和很低的检出限，可以用于测定各种抗原、半抗原或抗体。荧光免疫、发光免疫、酶联免疫，电化学免疫，放射性免疫。生物检定法：利用药物对生物体的作用以测定其效价或生物活性的分析方法。