大肠杆菌的分离和培养实验第一部分微生物的利用实验1大肠杆菌的培养和分离一、大肠杆菌结晶紫碘液95%乙醇菌落（colony）：一个细菌细胞在固体培养基上发展成一个肉眼可见，具一定形态结构的子细胞群。二、细菌的培养和分离接种环超净工作台高压蒸汽灭菌锅恒温培养箱摇床2、培养基：菌膜3、实验步骤：无菌技术高压蒸汽灭菌法：玻璃器皿、金属、移液枪头等（火焰）灼烧：接种环、试管口、三角烧瓶口紫外灯+过滤风：超净台灭菌（2）倒平板倒平板：10-12ml培养基/培养皿每倒入一个后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，并形成平面。制作试管斜面：1/3在试管外，2/3在试管内（3）接种培养（4）划线分离划线分离法恒温培养箱划线分离法（5）斜面接种保存涂布分离法首先，涂布分离法的操作比划线分离法更复杂。因为涂布分离法包括先将菌液稀释的步骤，而且通常要稀释多个浓度，常稀释到10-5-10-7倍。（稀释实验过程见P26图）在涂布时，从不同稀释度的稀释菌液中各取0.1ml放在平板固体培养基上，再用玻璃刮刀涂布后培养。其次，涂布分离法更易分开单菌落。通常培养皿中有20个以内的单菌落为最合适。土样稀释液样稀释未稀释的结果培养基根据凝固剂加入量的多少，产生不同的物理性质。可以分为：液体培养基半固体培养基（如0.2％～0.5％的琼脂）固体培养基（约2％的琼脂或5-12％的明胶）