第1章色谱分离原理ChromatographyPrinciple教学目的和要求1、了解色谱过程和分类；2、掌握色谱保留值的表达和计算（比移值、容量因子、保留时间、保留因子、容量因子等）；3、了解气相、液相色谱保留值规律、速率理论；4、掌握分离度的含义及计算方法。1.1概述1.2色谱过程及其分类慢中等快色谱分类气相色谱法1.3区带迁移柱色谱的区带迁移模式1.4色谱保留值分布系数K（distributioncoefficient）:当溶质在两相中达到分布平衡时，溶质在固定相和流动相中的浓度比值称为分布系数。色谱保留时间（retentiontime）tR、流速（flowrate）u和保留体积（retentionvolume）VR的关系:VR=utR相对保留时间1.4.2分子间的相互作用能色谱分离中的一个重要的热力学参数是容量因子k，其大小在热力学上取决于分配系数K，而K的大小又取决于溶质分子在两相间的相互作用能。相互作用能有多种形式：色散能、诱导能、取向能、电荷间相互作用能以及氢键等。分子间的相互作用能的一般表达式:1.4.3气相色谱保留规律1.4.4液相色谱保留规律MustoperateinhighpressureUsuallyconstructedofmetalsTypicaldimensions10-30cmlong1-3cmIDContainspackingmaterialwhichholdsthestationaryphaseManytypesexistTypicalpackingmaterialsare5-10µmindiameterGuardcolumnusedtoextendlifeofmaincolumn1.4.5洗脱的普遍性问题1.5谱带展宽1.6分离度resolution当色谱峰底宽交叠不易测量时，可以采用半高峰宽来代替峰底宽计算分离度，称为半高峰宽分离度R1/2。峰高分离度Rh：两个不等高的色谱峰的分离度。如何求算？1.6.1分离度与色谱柱特性当色谱保留值较大，相邻色谱峰底宽相近时，则分离度近似表示为：图6-10影响分离度的因素示意图搞清各项的物理意义1.7分离时间分离时间指物质对中第二个峰洗脱出来所需的时间，即tR2。对于多组分混合物，分离时间为最后一个组分的保留时间。亲和色谱(Affinitychromatography)1.Substrateanalogueaffinitychromatography超临界流体介绍扩散速度更快线速度更高复平衡速度更快更高的通量粘度更低压力降更小流速更高可实现多柱序列分离溶剂极性变化非线性有机改性剂的加入可以极大的改变流体的极性SFC为正相分离与传统液相相比，产生废弃的有机溶剂更少SFC对比HPLC的优势分离度公式选择性、柱效和容量对分离度的影响选择性与颗粒大小无关柱效范第姆特曲线（VanDeemterCurve）理论塔板高度与流速的关系颗粒度越小，增加线速度时牺牲的柱效越少。当SFC使用3um的色谱柱时，柱效基本无损失。范第姆特曲线最优流速经验公式范第姆特曲线最优流速经验公式压力降公式压力降简化经验公式SFC是一种超快速色谱(I):手性分离SFC是一种超快速色谱(II):非手性分离SFC在制药和天然产品分析中的应用生物柴油分析除草剂和农药Questionsforyou？本章结束