实习16分子流行病学应用.ppt
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实习要点一、分子流行病学产生的背景分子生物学理论和技术的飞速发展1953-DiscoveryofDNAdoublehelix(Crick&Watson)1960s-DNAtranscriptionmechanism1972-RecombinantDNAtechnology1985-PCR(KaryMullis)1990s-HumanGenomeProject2000s-HumanHaplotypeProject(一)疾病预防控制中的需求传染性疾病耐药性质粒;病原体变异;新发现传染病。慢性非传染病多病因、多阶段、多基因、长潜隐期。人群易感性生物个体间的遗传和环境不同,易感性差异很大;传统流行病学无法有效测量。实验医学实验医学的病因假设和防治措施的人群检验。(二)分子生物学的快速发展二分子流行病学的产生与发展(一)概念的演变国内:1988年:分子生物学理论和技术应用于流行病学的边缘学科,主要是通过对造成某一疾病流行的病原体,在基因水平上分析其特征,从而更准确地解决传染源和传播途径等有关流行病学问题。1992年:利用分子生物学原理和技术,从分子乃至基因水平上研究医学事件在人群和环境生物群众的分布及其决定因素和调控手段的学科。(二)定义将分子生物学理论和方法应用于流行病学研究的学问。(上世纪80年代)阐明疾病和健康状态相关生物标志(或分子事件)在人群和生物群体中的分布及其影响因素,并研究防治疾病、促进健康的策略和措施的科学。(第四版)阐明人群和医学相关生物群体中生物标志的分布及其与疾病/健康的关系和影响因素,并研究防治疾病、促进健康的策略与措施的科学。(第五版)分子流行病学是流行病学的一个分支(分子生物学?群体遗传学?)分子流行病学的主要研究内容是各种生物标志物及相关过程分子流行病学的研究方法是随着分子生物学的进展不断更新的传统流行病学A暴露█████疾病┗━━━━┳━━━━┛易感性三、常用的实验室检测技术核酸技术核酸电泳图谱核酸酶切电泳图谱核酸分子杂交核酸体外扩增核酸序列分析蛋白质技术凝胶电泳、蛋白转印杂交、蛋白质测序酶学技术多位点酶电泳法生物芯片技术基因芯片其他技术免疫学技术如酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光免疫试验(FIA)等;色谱技术如高效液相色谱技术(HPLC)等AutomatedLiquidHandlerSpectroPREPTM实验室中的质量控制测量指标的选择的原则分子流行病学研究成功的关键在采集和储存过程中不能受到“污染”储存的生物标本在任何时候进行检测都可以获得一致的结果所有的生物标本都应有详细的背景材料和鉴别标识实例分析研究实例3研究目的应用PCR测序追踪HIV传染源测量指标HIV/外周血单核细胞(介质)测量方法PCR和核酸测序研究设计横断面调查:1名牙科医生(HIV携带者,可疑传染源),7名HIV感染者(都曾接受该牙医的治疗);35名当地与牙医无关的HIV感染者。比较这些HIV毒株之间的关系。结果分析牙医的HIV株与其曾治疗的5名病人的HIV株具有克隆关系,而与其他毒株遗传关系较远。结论:牙医是其曾治疗的5名病人的HIV的传染源。四、应用前景传染病预防控制慢性非传染病预防控制健康状态研究展望谢谢!