基因工程复习题一、名词解释：（10～20%）基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶得Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交：将细胞或组织得核酸固定保持在原来得位置上，然后用探针与之杂交得一种核酸分子杂交技术，该方法可较好地反映目得基因在细胞或组织中得分布与表达变化。粘性末端：双链DNA被限制性内切酶切割后，形成得两条链错开几个碱基，而不就是平齐得末端。Northern印迹杂交：将RNA进行变性电泳后，再转移到固相支持物上与探针杂交得一种核酸分子杂交技术，可用于检测目得基因得转录水平。转位：一个或一组基因片段从基因组得一个位置转移到另一个位置得现象。基因工程：在体外，用酶学方法将各种来源得DNA与载体DNA连接成为重组DNA，继而通过转化与筛选得到含有目得基因得宿主细胞，最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子得过程称为基因工程，又称基因克隆、DNA克隆与重组DNA等。目得基因：基因工程中，那些被感兴趣得、被选作研究对象得基因就叫作目得基因。连接器：人工合成得一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段，连接到目得基因得两端，便于基因重组中得切割与连接。转化：受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变得过程。停滞效应：PCR中后期，随着目得DNA扩展产物逐渐积累，酶得催化反应趋于饱与，DNA扩增产物得增加减慢，进入相对稳定状态，即为停滞效应，又称平台期。逆转录PCR：以mRNA为原始模板进行得PCR反应。PCR:即聚合酶链式反应。在模板，引物，4种dNTP与耐热DNA聚合酶存在得条件下，特异性地扩增位于两段已知序列之间得DNA区段地酶促合成反应。α-互补（α-complementation）：指在M13噬菌体DNA或PUC质粒序列中，插入了lac启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸得核苷酸序列（又称α-肽），该序列不能产生有活性得β-半乳糖苷酶。感染（infection）特指以λ噬菌体、粘粒与真核细胞病毒为载体得重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力得病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当得细胞，并在细胞内扩增。其中，由噬菌体与细胞病毒介导得遗传信息得转移过程又称为转导（transduction）。47、转染（transformation）指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新得表型得过程。二、填空题（20%）1、DNA片段重组连接得方法主要有平端连接、粘端连接、同聚尾连接、加接头连接。2、感受态细胞就是指具有摄取外源DNA分子能力得细胞。3、λ噬菌体蛋白对重组DNA体外包装时，包装长度为野生型λDNA得75~105%。5、PCR反应体系含有耐热得TaqDNA聚合酶，化学合成得寡核苷酸引物，四种dNTP，合适得缓冲液体系。6、核酸探针包括：cDNA探针；基因组DNA探针；寡核苷酸探针与RNA探针。7、部分酶切可采取得措施有：(1)____________(2)___________(3)___________等。(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积8、DNA聚合酶I得Klenow大片段就是用_____________切割DNA聚合酶I得到得分子量为76kDa得大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________得活性。枯草杆菌蛋白酶；(1)5'-3'合成酶得活性；(2)3'-5'外切核酸酶9、为了防止DNA得自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。碱性磷酸酶；5’端得磷酸基团10、基因工程中有3种主要类型得载体：_______________、_____________、______________。质粒DNA；病毒DNA；质粒与病毒DNA杂合体11、pBR322就是一种改造型得质粒，它得复制子来源于，它得四环素抗性基因来自于，它得氨苄青霉素抗性基因来自于。pMBl；pSCl01；pSF2124(R质粒)13、DNA重组连接得方法大致分为四种：(1)_________________(2)_______________(3)_____________(4)_______________________。(1)黏性末端连接；(2)平末端连接；(3)同聚物接尾连接；(4)接头连接法14、差示杂交(differentialhybridization)技术需要__________________________。两种不同得细胞群体能够表达不同得基因，即在一个群体中能够表达一些基因，而在另一个细胞群体中不能表达这些基因16、将含有外源基因组一个酶切片段得质粒称之为含有一个__