第三章生化检验实验室基本知识水是常用的溶剂，天然水中含有许多杂质，如悬浮物、胶体物质和溶解物质，必须经处理去除杂质成为纯水，才能用于生物化学实验。否则，将严重影响实验结果的准确度和精密度。一、纯水的制备方法（一）蒸馏法将自来水在蒸馏器中加热气化，然后冷凝水蒸气即得蒸馏水，必要时可将蒸馏水再进行蒸馏得双蒸水。蒸馏水在25℃时的电阻率为1×105Ω/cm左右。（二）离子交换法将自来水通过离子交换柱去除水中杂质的方法。离子交换树脂是一种人工合成的带有交换活性基团的多孔网状结构的高分子化合物，在网状结构的骨架中，含有许多能溶液中的离子起交换作用的“活性基团”。当水通过阳离子交换树脂时，水中带正电荷的阳离子与树脂中的H+交换，而水中带负电荷的阴离子则与树脂中的OH－交换。离子交换水在25℃时的电阻率为5×106Ω/cm左右。水的纯度检查包括用电导仪测定其电导率或电阻率，用特定试剂检测水中残留的Ca2+、Mg2+、Cl－、SO42－等成分，细菌培养计数菌落。1.电阻率用电导仪或兆欧表测定，用电导仪测得的电导率，可与电阻率进行换算。电导单位为西门子（s），电导是电阻的倒数，即1s=1Ω－1；每cm长的电导为电导率（s·cm－1）。2.可溶性硅检验定性方法：纯水10ml加1%的钼酸溶液15滴，草酸与硫酸的混合液（4%草酸1份，加4mol/L硫酸3份）8滴，混匀，置室温10分钟，滴加1%硫酸亚铁溶液5滴，摇匀，以不显蓝色为合格（≤0..5mg/L）3.细菌菌落计数按常规菌落计数法进行。4.实验用纯水标准及用途1976年，CAP提出了实验用水的三级标准，1985年，NCCLS又提出了新标准。生化试剂及生化检验用水标准（CAP）特性指标Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级pH6.0～7.06.0～7.06.0～7.0电导率（μs/cm，25℃）＜0.1＜2.0＜5.0电阻率（MΩ/cm，25℃）＞10＞0.5＞0.2硅酸盐（mg/L）＜0.01＜0.01＜0.01重金属（mg/L）＜0.01＜0.01＜0.01NCCLS、CAP规定的等级纯水的用途级别用途NCCLSⅠ原子吸收、火焰光度、电解质、荧光、酶、高灵敏度层析、电泳、参比液、缓冲液Ⅱ一般实验检验、玻璃器皿冲洗Ⅲ玻璃器皿洗涤、要求不高的定性实验CAPⅠ原子吸收、火焰光度、电解质、血气及pH、酶、缓冲液、无机元素、参比液Ⅱ一般实验检验、血液学、血清、微生物检验等Ⅲ普通定性测定、尿液检验、组织切片、寄生虫、器皿洗涤二、普通玻璃仪器的清洗二、普通玻璃仪器的清洗2.量器类玻璃仪器如吸量管、滴定管、容量瓶等。使用后应立即浸泡于凉水中，勿使物质干涸；然后用流水冲洗，除去附着的试剂、蛋白质等物质。晾干后浸泡在铬酸洗液中4～6小时（或过夜），再用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～4次，晾干备用。3.其它具有传染性标本的容器，如病毒、传染病患者的血清等动污过的容器。应浸泡在杀菌剂（5％煤酚皂溶液）中过夜，进行消毒后再清洗。清洁液的配制和使用清洁液的配制和使用第三节实验方法的选择方法选择↓国际临床化学联合会（IFCC）根据分析方法准确度和精密度的不同分为三级（一）决定性方法：是指经过彻底研究未发现任何不精密和不准确因素的测定方法。测定结果最接近“真值”。主要是美国国家标准局和英国的研究中心，用于评价参考方法与标准品。（二）参考方法：是指精密度和准确度稍低于决定性方法，其各种轻微干扰因素为已知的分析方法。用于鉴定常规方法。（三）常规方法：这类方法的性能指标符合临床或其它目的需要，有足够的灵敏度，准确度和特异性。标准试剂（标准品、参考物）是一种物理或化学性质已充分确定用来校正仪器或证实某种实验方法的物质。1.一级标准品（原级参考物）是一种已经确定的稳定而均一的物质。其数值已由决定性方法确定，所有杂质均已定量，并附由证书。2.二级标准品（次级参考物）这类物质包括纯物质（水或有机溶剂溶液）和生物源性介质（透析后血清）中含有参考物质成分的制品。用于常规方法的标化或质控物定质。3.质控物质用生物活性介质制成，用原级或次级参考物质为标准，采用参考方法定值，用于常规室内、室间质控。选择方法需考虑下列三个方面的性能1.方法学特性是指提供最好性能的那些根本因素，常与反应的灵敏度及特异性有关。包括化学反应原理、最适反应条件、标化方法及分析操作的严密性等。2.工作特性是证明方法性能的那些因素，包括分析测定范围（线性或工作范围）、精密度、回收率、干扰、准确度及检出限度等。3.应用特性即实用性、成本费用、标本来源与种类、样品用量、分析速度，对设备条件与操作技术要求，方法的安全性。（一）广泛查阅文献根据方法选择的要求对各种方法进行比较，了解各方法的科学依据和使用价值。（二）选定候选方法根据本实验室的设备条