小抄——酶工程.doc
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蛋白质的化学修饰:广义上讲,凡是通过化学基团的引入或除去而使蛋白质共价结构发生改变,都可称为鞍字实幕奘?交联剂:具有两个反应活性部位的双功能基团可在相隔较近的两个氨基酸残基间,或酶与其它分子间发生交联反应的一类有机试剂交联修饰:使用双功能基团试剂将酶分子间、亚基之间或分子内不同肽链部分间进行共价交联的酶的化学修饰。可使酶活性结构加固,并可提高稳定性,增加酶在非水溶液中的使用价值蛋白质的稳定性:蛋白质抵抗各种因素的影响、保持其生物活力的能力。蛋白质工程:是指用基因操纵技术高度专一性地改变目标蛋白质。固定化修饰:通过酶表面的酸性或碱性残基将酶共价连接到惰性载体上,由于酶所处的微环境发生改变,使酶的最适pH、最适温度和稳定性发生改变。固定化酶(细胞)的活力:指固定化酶(细胞)催化某一特定化学反应的能力,其大小可用在一定条件下它所催化的某一反应的反应初速度表示偶联率:偶联率=(加入蛋白活力-上清液蛋白活力)//加入蛋白活力×100%活力回收:活力回收=固定化酶总活力//加入酶的总活力×100%酶活力回收率:是指固定化酶的总活力与用于固定化的总酶活力的百分率。相对活力:相对活力=固定化酶总活力//(加入酶总活力-上清液中未偶联酶活力)×100%固定化酶(细胞)的半衰期:指在连续测定条件下,固定化酶(细胞)的活力下降为最初活力一半所经历的连续工作时间,以t1//2表示酶工程:酶的生产与应用的技术过程称为酶工程水活度(Aw):是指在反应体系中水的逸度与纯水逸度之间的比值。分子印迹酶:通过分子印迹技术可以产生类似于酶的活性中心的空腔,对底物产生有效的结合作用??同时在结合部位的空腔内诱导产生催化基团,并与底物定向排列,制备出人工模拟酶。抗体酶:具有催化能力的单克隆抗体,是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物。核酶:具有催化活性的酶性RNA。脱氧核酶:脱氧核酶都是单链DNA分子通过自身卷曲、折叠形成的三维结构,在某些特殊的辅助因子的作用下与底物结合并发挥催化功能。表面分子印迹:在某些载体表面产生分子印记空腔或进行表面修饰产生印记结合部位的过程。生物印迹:是分子印记的一种形式,它是指以天然的生物材料(如蛋白质和糖类物质)为骨架,在其上进行分子印记而产生对印记分子具有特异性识别空腔的过程。分子印迹:以一种分子充当模板,其周围用聚合物交联,当模板分子除去后,此聚合物就留下了与此分子相匹配的空穴。如果构建合适,这种聚合??就像"锁"一样对钥匙具有选择识别作用,这种技术被称为分子印迹。酶分子的合理设计:利用各种生物化学、晶体学、光谱学等方法获得有关酶分子的结构、特性和功能的信息,并搞清结构和功能的关系,然后以此为依据,采用改变酶分子中个别氨基酸残基的方法对酶分子进行改造,产生具有新性状的酶分子,因而该方案称为酶分子的合理设计。酶分子的非合理设计:在事先不了解酶分子三维结构信息和催化机制,对酶的结构与功能的相关性知之甚少的情况下,人为地改造特定的进化条件,在体外模拟漫长的自然进化过程,使基因发生多种变异,最后定向选择或筛选出所需性质或功能的突体酶,该策略称为酶分子的非合理设计。模拟酶:用人工方法合成的具有活性中心和催化作用的非蛋白质结构的化合物。肽酶:就是模拟天然酶活性部位而人工合成的具有催化活性的多肽。半合成酶:是以天然蛋白或酶为母体,用化学或生物学方法引进适当的活性部位或催化基团,或改变其结构从而形成一种新的"人工酶"。光学活性化合物:是指那些化学组成相同,但是立体结构不同而成为恰如人的左右手一样互成对映体的化合物,也称为手性化合物。反相胶束:表面活性剂溶于非极性的有机溶剂中,当其浓度超过临界胶束浓度(CMC)时,在有机溶剂内形成的胶束叫反胶束(reversedmicelle),或称反相胶束。必需水(essentialwater):在有机介质中,酶分子需要一层水化层以维持其完整的空间构象,一般将维持酶分子完整空间构象所必须的最低水含量称为必需水。化学酶工程:也可称为初级酶工程(primaryenzymeengineering),是指天然酶、化学修饰酶、固定化酶及人工模拟酶的研究和应用。生物酶工程(biologicalenzymeengineering):指利用酶学和以基因重组技术为主的现代化分子生物学技术相结合,设计和生产酶的技术,也称高级酶工程(advancedenzymeengineering)。主要包括3方面的内容:用基因工程技术大量生产酶(克隆酶);对酶基因进行修饰,产生遗传修饰酶(突变酶);设计新酶基因,合成自然界不曾有的新酶。固定化酶:是指固定在水不溶性的载体上,并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。固定化细胞:固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞.该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢,又称固定