免疫学技术第九讲主要内容一、免疫血清学技术一、免疫血清学技术一、免疫血清学技术一、免疫血清学技术一、免疫血清学技术一、免疫血清学技术11一、免疫血清学技术二、主要血清学技术二、主要血清学技术二、主要血清学技术二、主要血清学技术小鼠脾脏免疫荧光图像3、免疫酶技术(1)原理:通过化学方法将酶与抗体或抗抗体结合,形成酶标记物,这些酶标记物仍保持免疫学活性和酶得活性,然后将她与相应得抗体或抗原起反应,形成酶标记得抗原-抗体复合物,结合在免疫复合物上得酶在遇到相应得底物时,而显色。3、免疫酶技术(2)分类:3、免疫酶技术(3)特点:灵敏度高,检测能力可达毫微克水平。应用范围广,既能测抗体又能检测抗原,既能定性又能定量、定位及抗原分析。标本可长期保存。酶标记物有效时间较长,一般低温保存可达一年以上。不需要特殊设备。(4)操作过程:二、主要血清学技术专题二:细胞免疫技术细胞免疫技术主要细胞免疫技术主要细胞免疫技术3H胸腺嘧啶核苷(3H-T)掺入法原理:试验管对照管PHA+T细胞+3H-TdRPHA+T细胞转化转化淋巴母细胞淋巴母细胞(掺入3H-TdR)(无3H-TdR掺入)液体闪烁仪测掺入测CPM3H-T得脉冲数CPM计算转化刺激指数SI=试验管CPM/对照管CPM特点:准确,需昂贵得闪烁仪原理:PHA、ConA+T细胞(受体)转化分裂、增殖脱氢酶甲氮唑盐(MTT)甲簪(formazan)酶标仪(595nm)测OD值特点:敏感、准确