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会计学一、基因工程的操作步骤:①目的基因的获取;②形成重组DNA分子;③重组DNA导入受体细胞;④筛选含有目的基因的受体细胞;⑤目的基因表达。1.第一步:目的基因的获取①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因聚合酶链式反应(PCR技术)双链DNA思考:PCR技术扩增目的基因,需要什么前提和条件?过程如何?原理是什么?人工合成基因的方法大片段DNA如何从基因文库中获取目的基因?2、形成重组DNA分子(构建基因表达载体)3、将重组DNA导入受体细胞1.将重组DNA导入植物细胞(2)将重组DNA导入动物细胞重组质粒感受态:细胞处于容易吸收外源性DNA的状态。处于感受态的细胞称为感受态细胞.4.筛选含有目的基因的受体细胞思考:通常为什么要选用含有两个标记基因的运载体?没有质粒①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因(关键)(2)基因工程的的原理及技术检测—目的基因与质粒的连接基因DNA文库的构建将总DNA经过酶解,分离不同长短的DNA片段。包含的基因片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上,感染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因文库。DNA分子杂交示意图基因探针(DNA探针)与目的基因杂交,有无杂交带传统的遗传育种方法有哪些?传统的遗传育种方法能否解决不同种生物优良性状的重组问题?基因工程技术如何解决不同种生物优良性状的重组问题?基因工程的应用基因工程的应用基因工程与疾病治疗基因工程胰岛素基因工程胰岛素基因工程干扰素SCID的基因工程治疗基因治疗SCID的过程基因工程与生态环境保护