仅用化学药品重编程人体肝癌细胞治疗肝癌的方法HisashiMoriguchi,a1,2YueZhang,3MakotoMihara,1ChifumiSato41诱导多功能肝细胞研究和应用部，整形外科系，医学院，东京大学，东京，日本2麻省总医院和哈佛医学院，波士顿，美国3放射肿瘤系，贝斯以色列女执事医疗中心和哈佛医学院，美国4健康科学分析系，健康科学研究生院，东京医科齿科大学，东京，日本a邮箱：moriguchi-tky@umin.ac.jp接收于2011-09-14，接受于2011-12-23这项工作经CreativeCommonsAttribution授权-非商业使用-共享许可证。许可证副本见http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/摘要目前已经有多种能够直接重编程人体肝细胞的方法。然而，还没有重编程或消除人肿瘤细胞的方法。我们发现了一种新的治疗方法能通过化学物质重编程或消除人体实体肿瘤细胞。这种治疗方法对多种表达阿尔酮还原酶家族1成员B10（AKR1B10）和类维生素AX受体（RXRs）的人体肿瘤细胞适用。其他章节已经报道了一些直接重编程人体体细胞的方法。然而，重编程并破坏人实体肿瘤细胞的治疗方法尚未报道。非环式维生素A在小的随机试验中（样本n=89）可以降低肝癌治疗的复发率。在最近一个大的随机试验中（n=401）也观察到了类似的结果。根治2年或以上的危险度（ACR/对照）为0.27（(95%可信区间:0.07–0.96)）。而ACR不能抑制根治1-2年的复发率。根治1年内的危险度（ACR/对照）为0.72（95%可信区间：0.45–1.17）。据推测，阿尔酮还原酶家族1成员B10（AKR1B10）可抑制维甲酸A诱导的细胞分化。然而，这个推测并未被证明。结果接受肝脏移植的患者肝癌细胞AKR1B10的表达情况参照之前我们和他人的研究方法（参考方法），我们研究了10个患肝癌并接受肝脏移植的病人AKR1B10在肝癌细胞中的表达情况。6位患者的AKR1B10表达情况见图1a，1b和补充图片1a。图1进行肝脏移植的肝癌病人（n=6）肝癌细胞AKR1B10表达的免疫印迹分析。其余患者（n=4）为AKR1B10阴性。β-肌动蛋白为内参。表达AKR1B10蛋白的6位肝癌患者的体外抗癌药物灵敏度测试在体外，对表达AKR1B10的6名肝癌患者进行抗癌药物的灵敏度测试（参考方法）。6天时在只用ACR处理和用ACR和唑泊司他（1种AKR1B10抑制剂）共同处理的AKR1B10阳性肝癌细胞的细胞活力有显著差异（Figure2A;P<0.001,曼惠特尼测验）。6天时在只用唑泊司他处理和用ACR和唑泊司他共同处理的AKR1B10阳性肝癌细胞细胞活力也有显著差异（Figure2A;P<0.001,曼惠特尼测验）。此外，ACR单独处理样品3天时α甲胎蛋白（AFP）平均值为45.3 ng±5.2 ng/L×104cells/24 h，而用ACR和唑泊司他共同处理的平均值显著增加为3.6 ng±2.2 ng/L×104cells/24 h(P<0.001,曼惠特尼测验)。单独用ACR处理样品3天时，清蛋白平均值为19.3 ng±7.3 ng/L×104cells/24 h，而用ACR和唑泊司他共同处理的值显著增加，为93.3 ng±3.0 ng/L×104cells/24 h(P=0.02,曼惠特尼测验)。图2AKR1B10阳性肝癌细胞在处理6天后的细胞活力。AKR1B10阴性肝癌细胞在处理6天后的细胞活力。未表达AKR1B10蛋白的4位肝癌患者的体外抗癌药物灵敏度测试在体外，对未表达AKR1B10的4名肝癌患者也进行抗癌药物的灵敏度测试（参考方法）。6天时只用ACR处理和用ACR和唑泊司他共同处理的AKR1B10阴性肝癌细胞的细胞活力有显著差异（图2B;P=0.02,曼惠特尼测验）。另外，处理6天，只用唑泊司他处理和用ACR和唑泊司他共同处理的AKR1B10阴性肝癌细胞细胞活力有显著差异（图2B;P<0.001,曼惠特尼测验）。此外，ACR单独处理样品3天时α甲胎蛋白（AFP）平均值为50.3 ng±6.5 ng/L×104cells/24 h，而用ACR和唑泊司他共同处理的平均值显著增加为7.6 ng±3.5 ng/L×104cells/24 h(P=0.01,曼惠特尼测验)。单独用ACR处理样品3天时，清蛋白平均值为17.1 ng±5.2 ng/L×104cells/24 h，而而用ACR和唑泊司他共同处理的值显著增加，为85.3 ng±3.9 ng/L×104cells/24 h(P=0.02,曼惠特尼测验)。肝癌细胞耗氧量AKR1B10阳