会计学一、生物下游加工技术二、分离纯化的一般流程人干扰素、是一种重要蛋白类生物药品，具有抗癌和治疗肝炎等作用。在实践工作中选择方法时:首先，应对被纯化的酶的理化性质有—个比较全面的了解;其次，判断采用的方法和条件是否得当，始终以测定酶活性为标准。再者，在纯化工作中，往往不宜重复采用相同的步骤和条件。最后，要严格控制操作条件。随着酶的逐步纯净，杂蛋白含量亦逐步降低，蛋白质之间的相互作用力随之下降,酶更不稳定，因此,更要防止酶变性。三、酶分离纯化的基本原则（一）酶分离纯化包括三个基本环节/第一节从发酵液制取酶提取液（酶溶液的制备）三、细胞破碎四、抽提分离依据的性质第三节酶的沉淀分离3、盐析操作（2）调整盐浓度的方法加固体（NH4）2SO4：(25℃)当溶液体积不大，要达到的盐浓度不高，可以加入饱和硫酸铵溶液；当溶液体积较大，要达到的盐浓度又较高，此时加入固体硫酸铵较好。/（二）等电点沉淀（三）有机溶剂沉淀法（四）复合物沉淀法（五）选择性变性沉淀法借助于一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离、提纯或浓缩的新型分离技术。一、膜分离的类型各种膜分离法的原理和应用范围（一）微滤(MF)（二）超滤(UF)（三）反渗透(RO)（四）电渗析三、膜分离技术的基本流程中空纤维超滤器中空纤维膜分离装置是将成束的中空纤维装入一筒内，两端封闭。当轴流通过管腔时，造成高剪切力，在截留溶质分子的同时，将浓度降至最低限度。每根中空纤维内腔直径为0.2mm,中空纤维由惰性的非离子聚合物制成．具有各向异性、抗堵塞性，运用成束纤维表面积大，流量大、阻留溶质的浓度范围(4％一20％左右)如右图。中空纤维超滤膜组件清洗液//五、膜及膜的使用性能生物分离过程常用的膜分离技术为超滤、微滤和反渗透。为实现高效率的膜分离操作，对膜材料有如下要求：(1)起过滤作用的有效膜厚度小，超滤和微滤膜的开孔率高，过滤阻力小；(2)膜材料为惰性，不吸附溶质(蛋白质、细胞等)，从而使膜不易污染，膜孔不易堵塞；(3)适用的pH和温度范围广，耐高温火茵，耐酸碱清洗剂，稳定性高，使用寿命长；(4)容易通过清洗恢复透过性能；(5)满足实现分离目的的各种要求，如对菌体细胞的截留、对生物大分子的通透性或截留作用等。目前市售膜的种类很多，主要有天然高分子、合成高分子和无机材料。下面简要介绍制造超滤、微滤和反渗透膜的各种膜材料。1.天然高分子材料主要是纤维素的衍生物，有醋酸纤维、硝酸纤维和再生纤维素等。其中醋酸纤维膜的截盐能力强，常用作反渗透膜、也可用作微滤膜和超滤膜。醋酸纤维膜使用最高温度和pH范围有限，一般使用温度低于45～50℃，pH3～8。再生纤维素可制造透析膜和微滤膜。2.合成高分子材料市售膜的大部分为合成高分子膜，种类很多，主要有聚砜、聚丙烯晴、聚酰亚胺、聚酰胺、聚烯类和含氟聚合物等。其中聚砜是最常用的膜材料之一，主要用于制造超滤脂。聚砜膜的特点是耐高温(一般为70～80℃，有些可高达125度)，适用pH范围广(pH1～13)，耐氯能力强，可调节孔径范围宽(1～20nm)。但聚砜膜耐压能力较低，一般平板膜的操作力极限为0.5～1.0MPa。聚酰胺膜的耐压能力较高，对温度和pH都有很好的稳定性，使用寿命较长，常用于反渗透。3无机材料主要有陶瓷、微孔玻璃、不锈钢和碳素等。目前实用化的无机膜主要有孔径0.1μm以上的微滤膜和截留相对分子质量l0kD以上的超滤膜，其中以陶瓷材料的微滤膜最为常用。多孔陶瓷膜主要利用氧化铝、硅胶、氧化锆和钛等陶瓷微粒烧结而成，膜厚方向不对称。无机膜的特点是机械强度高，耐高温、耐化学试剂和耐有机溶剂，但缺点是不易加工，造价较高。另一类无机微滤膜为动态膜(dynamicmembrane)，是将含水金属氧化物(如氧化锆)等胶体微粒或聚丙烯酸等沉积在陶瓷管等多孔介质表面形成的膜，其中沉积层起筛分作用。动态膜的特点是透过通量大，通过改变pH值容易形成或除去沉积层，因此清洗比较容易，但缺点是稳定性较差。1、若除去酶溶液中的盐分，可采用下面哪种分离方式？（）A、板框过滤B、微滤C、超滤D、反渗透2、若要分离除去酶溶液中的生物小分子，可采用下面哪种分离方式？（）A、板框过滤B、微滤C、超滤D、反渗透第四节离心技术在酶分离纯化中的应用相对离心力：（二）离心机分类料液（三）离心方法（四）离心沉降速度和沉降系数（五）离心时间作业题：1、在25℃下，将800L含硫酸铵为0.2S的溶液提高到0.5S，需要加饱和硫酸铵溶液多少升？或者加固体硫酸铵多少公斤？2、实验室台式离心机转速为4000r/min，离心半径5cm，RCF为多少？工业离心机同样转速，离心半径为0.3m，离心分离因素是多少