基因工程制药第一节概述第二节基因工程药物的生产的过程第三节目的基因的获得第四节基因表达第五节基因工程菌生物代谢的特点第六节基因工程菌的不稳定性第七节基因工程菌中试第八节重组工程菌的培养第九节高密度发酵第十节基因工程药物的分离纯化第十一节变性蛋白的复性第十二节基因工程药物的质量控制第十三节基因工程药物的制造实例第一节概述为什么选择基因工程生化提取基因工程表达人生长激素（侏儒症）基因工程药物在解决癌症、病毒性疾病、心血管疾病和内分泌疾病等方面取得明显的效果，为上述疾病的治疗、预防和诊断提供了新型药物、新型疫苗和新型诊断试剂。基因工程技术可生产的药物和制剂包括：基因工程技术生产药品的优点：关于中国第二节基因工程药物生产过程基因工程技术是将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成工程菌(或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术基因工程药物制造的主要步骤制备基因工程药物的基本过程基因工程的上游和下游基因工程重组菌构建示意图上游阶段：主要是分离目的基因、构建工程菌(细胞)。目的基因获得后，最主要的就是目的基因的表达。选择基因表达系统主要考虑的是保证表达的蛋白质的功能，其次是表达的量和分离纯化的难易。此阶段的工作主要在实验室内完成。下游阶段：从工程菌的大量培养一直到产品的分离纯化和质量控制。此阶段是将实验室的成果产业化、商品化，包括工程菌大规模发酵最佳参数的确立，新型生物反应器的研制，高效分离介质及装置的开发，分离纯化的优化控制，高纯度产品的制备技术，生物传感器等一系列仪器仪表的设计和制造，电子计算机的优化控制等。第三节目的基因的获得一构建基因组文库分离目的基因基因组文库（DNA文库）构建流程基因组文库法只适合原核基因的获得，不适用于真核基因。原核基因与真核基因的区别二反转录法反转录合成基因的步骤：cDNA克隆示意图1.mRNA的纯化2.cDNA第一链的合成4.cDNA克隆5.将重组体导入宿主细胞7.目的cDNA克隆的分离和鉴定三PCR法直接克隆基因PCR的条件PCR三步曲PCR原理示意图四反转录-聚合酶链反应法五化学合成法化学合成基因的限制：六对旧基因的改造蛋白质工程药物的分子设计方法第一节概述生化提取基因工程表达人生长激素（侏儒症）基因工程技术可生产的药物和制剂包括：第二节基因工程药物生产过程制备基因工程药物的基本过程一构建基因组文库分离目的基因原核基因与真核基因的区别PCR三步曲