·58·(总第133期)水利渔业2004年第24卷第3期淡水养殖鱼类病原菌药敏实验林春友，王云祥(天津市水产研究所300221)摘要：25种抗菌药物对淡水鱼类6种病原菌分别表现出敏感、中度敏感和耐药3种结果。测定14种抗菌药物对淡水鱼类6种病原菌的最小抑菌浓度，结果显示，不同药物对同一病原菌和同一药物对不同病原菌均具有不同的MIC。在淡水鱼类细菌病防治过程中，应选择药敏反应敏感或MIC较低且吸收较好的抗菌药物，并交替使用，以防止耐药菌株的产生。关键词：淡水鱼；病原菌；药敏反应；细菌病防治中图分类号：$948文献标识码：A文章编号：1003—1278(2004)03—0058—02随着集约化程度的提高，鱼类细菌病的发生愈加频1．3药物敏感实验·繁，严重制约r水产养殖业的发展。由于缺乏基本的药1．3．1纸片琼脂扩散法采用改良的Kirby—Bauer(K理知识，养殖单位存在滥用药物的现象，这不仅会导致耐—B)氏法。28℃培养24h，观察抑菌圈的大小及敏感性。药菌株的产生，也将给日后细菌病的防治带来更大的困1．3．2常量稀释法采用Nccls及Ies推荐的Mul1er难。因此，我们进行了抗菌药物对淡水鱼类病原菌的药Hinton液体培养基。敏实验，旨在为淡水鱼细菌病防治提供依据。①抗菌药物溶液的制备。将药物用适宜的溶媒溶解后，用无菌蒸馏水或其他溶剂配置成2560旭(IU)／n1材料与方法药液备用。1．1供试菌株配制药液所需药物(mg)=[溶液体积(n)×溶液浓共6种。中科院水生所提供5种：柱状屈挠杆菌(烂度(mL)]／药物活力(~g／mg)鳃病病原菌)，代号G4；嗜水产气单胞杆菌嗜水亚种(打印②标准接种液的制备。用接种环取一待测菌种接种病病原菌)，代号ST78—3—3；苏伯利产气单胞菌(烂尾到2InLMH肉汤培养基中，28℃培养6h，用MH肉汤校病病原菌)，代号CR79—1—1；荧光假单胞菌(赤皮病病正菌液浓度至0．5麦氏标准浊度，此浊度含菌量为10／原菌)，代号56一l2—10；肠型点状产气单胞菌(肠炎病InIJ，再用肉汤按1：100稀释(含菌量约为10／n)备用。病原菌)，代号58—20—9。天津水产研究所分离1种：嗜校正好的菌液应尽快在15min内接种。水产气单胞菌(出血性败血病病原菌)．代号HLS91—08③各种药物对病原菌的MIc。用MI--I肉汤将药液依—02。次对倍稀释至256、128、64⋯⋯0．24、0．12、0．06旭(或1．2供试药物IU)／InIJ13个2倍稀释浓度，取每个浓度的药液1n分药敏纸片由中国药品生物制品检定所提供。该所还装于13nlrn×100InIn试管内，取校正好的菌液1n分提供9种抗菌药：土霉素(Oxytetracydine)效价912IU／别加到各试管中，使接种后每支试管的含菌量为5×10／mg，四环素(Teracycline)效价971IU／mg，多西环素InIJ，此时各管药物浓度为128、64、32、⋯⋯0．12、0．06、(Doxyeycline)效价864IU／mg；，庆大霉素(Gentarnicin)效0．03(IU)／InIJ；同时设不含抗菌药物只含定量菌液的价636IU／mg，卡那霉素(Kanamycin)效价775IU／mg，链阳性对照管，不含抗菌药物和菌液的阴性对照管。28℃霉素(Streptomycin)效价741IU／mg，红霉素(Ery—培养24h，以肉眼观察无细菌生长试管中的最低药物浓thromycin)效价884IU／mg，麦白霉素(Meleumycin)效价度为MIC。849IU／mg，羟氨苄青霉素(Amoxicillin)纯度86．2％。诺2结果与分析氟沙星(Norfloxadn)纯度98．5％，批号980601，天津中央制药厂生产；氟苯尼考(Florfenico1)纯度98．5％，批号2．1改良K—B氏法检测25种抗菌药物敏感性0212006，湖北中牧安达药业有限公司生产；新诺明(Sul—结果见表1。荧光假单胞菌对9种药物反应敏感，占famethoxazole)纯度99％，批号990425．江苏昆山制药总厂被测药物的36％；对3种药物中度敏感。占被测药物的生产；甲氧苄氨嘧啶(Trimec}1oprim)纯度99％，批号12％；对13种药物耐药，占被测药物的52％。肠型点状981058，寿光富康制药有限公司生产；磺胺二甲嘧啶(S一产气单胞菌对16种药物反应敏感。占被测药物的64％；fafurazolum)纯度99％，北京第二制药厂生产。对1种药物中度敏感，占被测药物的8％；对7种药物耐药，占被测药物的28％。嗜水气产单胞杆菌嗜水亚种对收稿日期：20