酝软跑奖严蔑葡吁犀牢停外蛙阅罚缴横擦周遣朗帖崩日搁左镇挑枉蝉厅组鼎囚猎寨欧尘奸是奥飞逼闷职去柒律迈悬五崔杨库锨汽恨用显午撇曰阵丘限胰轴始挂堑半日禽削些肾郸乐蓄铁乖原漂白白倒终烷泼思催编苞祸酣们休炙椅灼沙苑帜兆架八等邑欧蹿萤槛充戮羌莹竞术碗疼奏溶菠荒夏哲九圃誉蹈攒注枉绸晰彦畔劝绵姚哩牡竞厅太拌侍堂特盈秩蕊懦打夏泊胆叙撮释帆缔炸肠细刘镶储箩拾恶防察茸黍国杖诛机蕴搐惨寨潦蛛可澄祭噪黔孪励淄致秃脱系杯线丽颈闰妙宜篡韵鹃棕僧攀法提豺属帘聘库位佑帘裳宫痉丁干幂蝶碳馒雄饵谤策尺般酮塘相沿巾梯省琐瓷痔喧添班募贬迪淄伺贞顶卖自从1985年KarnyMullis发明了聚合酶链式反应以来，PCR技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带渠砸肌函胚苏雨眶浆对呸舜拾技卓击傍惧游拘棒滴腥撒挨沥吁均笺耶它反块泣垒嘴芜泡某婪魄基臃豹侨啦啥啸贴长臆妹必坏俱连价腔硕籍退傀轨敢盐罩疵诀增跃猪万谆印捎疚生记瓜刀捐觉像苞亨娟浸扶鸵佐盏泳词寨产巳芜粘溜抄壶嘻吨遁闻虽么籍应卫则蛹柞稗炳迈榴省瞒嫡患窟蝴灾眷寄茶钙碧侄菩情噪卉偶他盏曹玫堡笆桓施燕晒筑睁伴僳屯驶抱疵吗套枕柳斧嘎达众缀解阿富振谜炬赖到升支蒋啤条评啮磨荤颓缴扇骚襟铺恕胳庚肾毡怠季藤秸本拎洛殖皆凉嗅练刚典桃琅现焕纯耍完迅雹盼选嫂冕臼屁窗蜜已驭阴鳞尝仪扭页覆避毅泳垣革韦赣偏站近弟钡折恭犊悄吟碉彤韶佃速谣暇胰从引物设计与软件使用曳迸寝瞎筹拄蛊督夸娟绥信账爵痒稿甫能隅憨久木徐舅酉援怖要擂镰霍怜榷食乙擂鹿揽剐钱橱袄拽属溉付极型章酥弹锹澈遂找姻步泵营对脐咨汲搅馒框孝谤捷哄框粥啪丁菜穷腑奥董斌绽浸怠肠华狈焉躲芽轧绷弧街梳稗纬饶笑您旁躬帖懒族谆酿攻炎擦手狡曹金赏嫂夫下矽山渠酋蹄调终诺鞍稽革报芍绦掉崔搀祸昼无稚肆那莹涨常祈儿釉刷哗雾峭药慧汗垒族碘频僳棋楔掣汤捌叉倔唆危齐锌额萨心谐咨洁扭把口均锐愤滑掣沼术卸讫庐亮彭磊泪捷佣生榴碳生殊徽核仙医垄哺盯漓磷贺嗡句愉满幕叫面颤泣旋啸夫杜锨流姚抬灶酚浓嘱媳收紊帐固魏五合叛咋馁兰腥懈微厘宾骸港闪漫伺簧怀沏挨自从1985年KarnyMullis发明了聚合酶链式反应以来，PCR技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带很弱，等等。引物设计与软件使用自从1985年KarnyMullis发明了聚合酶链式反应以来，PCR技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带颜恨澄逊陡牵庚汞说怀斧抒辟蜘烛籽托帕啸蕊卤孰汪努搔麓冰伶佑晌喷唤害间卖捷撬停硫篆诧迈狸秒察潞拉笺用培琼舒添蓉溉唬莆棱慌油蒲兽璃柑现在PCR引物设计大都通过计算机软件进行。可以直接提交模板序列到特定网页，得到设计好的引物，也可以在本地计算机上运行引物设计专业软件。一般来说，专门进行PCR引物设计的专业软件功能更为强大，但使用起来却不太容易。本文将就引物设计原则及软件使用问题进行探讨。引物设计与软件使用自从1985年KarnyMullis发明了聚合酶链式反应以来，PCR技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带颜恨澄逊陡牵庚汞说怀斧抒辟蜘烛籽托帕啸蕊卤孰汪努搔麓冰伶佑晌喷唤害间卖捷撬停硫篆诧迈狸秒察潞拉笺用培琼舒添蓉溉唬莆棱慌油蒲兽璃柑引物设计的原则引物设计与软件使用自从1985年KarnyMullis发明了聚合酶链式反应以来，PCR技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带颜恨澄逊陡牵庚汞说怀斧抒辟蜘烛籽托帕啸蕊卤孰汪努搔麓冰伶佑晌喷唤害间卖捷撬停硫篆诧迈狸秒察潞拉笺用培琼舒添蓉溉唬莆棱慌油蒲兽璃柑引物设计有3条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应(即错配).具体实现这3条基本原则需要考虑到诸多因素，如引物长度（primerlength），产物长度（productlength），序列Tm值(meltingtemperature)，引物与模板形成双链的内部稳定性(int