二、内容：母液配制，培养基培制，器具干热、湿热灭菌。活化菌种，接种，扩菌，杂交，涂平板，培养，点种A，点种B-G。实验结果观察统计分析，基因位点距离计算。F-菌株×F+菌株随机中断：各种条件影响→转移随机中断。完整染色体进入Fˉ细菌的机会很少，完整的F因子转移机会也很低。导致：1）Hfr菌株与F-菌株的杂交一般不会使Fˉ变成Hfr或F+。2）Hfr染色体上的基因呈梯度转移:abacbadcba非中断杂交（interruptedmatting）基因定位：自然中断重组的百分率为指标中断杂交（non-interruptedmatting）基因定位：人为中断接合供体基因在受体中的出现时间为指标后者比前者操作复杂两种方法测定两个紧密连锁基因时精度较差（以传统重组作图更好）。三、实验材料：Hfr品系：CSH60Strs，其余性状为野生型（供体）F-品系：CSH57Strr，多重生化缺陷型：（met、lue、trp、his、adeorpur、arg、lac、gal）（受体）CSH57Strr，多重生化缺陷型不能合成met、lue、trp、his、adeorpur、arg不能利用lac、gal如何选出各种重组子，排除供（父）、受（本）体？本实验所配制的选择培养基：A培养基：排除供、受体选择全部重组子B~G培养基：选择各种重组子求出重组频率确定基因连锁情况各种选择性培养基四、方法步骤：配制各种选择性培养基的基本溶液（一）配制各种选择性培养基的基本溶液（五）配制各种选择性培养基（此为100mL培养基配方）配制方法：1.称取琼脂+水,煮沸2.另取其它各成分于一小烧杯中，一同加入煮好的琼脂中。3.分装,灭菌（8磅，112℃，20min）各小组灭菌后需收齐的物品：A培养基250mL（分装2个250ml三角瓶）B-G培养基各30mL（装于6个100mL三角瓶）LB培养基10mL（分装2个50mL三角瓶,上交）空的100mL三角瓶（1个）牙签（200只）枪头（蓝、黄各1盒，）培养皿（20个）