第三章 酶的发酵生产.ppt
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第三章酶的发酵生产酶的生物合成:经过预先设计,通过人工操作控制,利用细胞(微生物细胞、植物细胞和动物细胞)等的生命活动,产生人们所需要的酶的过程。①繁殖快,产酶量高,生产周期短。②能在便宜的底物上良好生长。③产酶性能稳定,不易退化,不易受噬菌体侵袭。④产生的酶容易分离纯化。⑤不是致病菌及产生有毒物质或其他生理活性物质。1.2常见产酶微生物直状、近直状的杆菌,革兰氏阳性,无荚膜,芽孢中生或近中生。枯草芽孢杆菌是工业发酵的重要菌种之一。生产淀粉酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、碱性磷酸酶等。应用:淀粉酶、果胶酶、脂肪酶等。酿酒工业上常做糖化菌(酶)。有些根霉还能产生乳酸、延胡索酸等有机酸。7(5)酵母假丝酵母假丝酵母的细胞圆形,卵形或长形。可生产脂肪酶、尿酸酶、尿囊素酶、转化酶、醇脱氢酶等。第二节产酶微生物筛选1)样品的采集:从富含该酶作用底物的场所采集样品2)富集培养:投其所好,取其所抗3)分离培养:获得微生物的纯培养4)初筛:选出产酶菌种,以多为主5)复筛:选出产酶水平较高的菌株,以质为主蛋白酶产生菌的获得方法菌种的退化与活化衰退的防止1)控制传代次数2)创造良好的培养条件3)利用不易衰退的细胞传代4)采用有效的菌种保藏方法保藏细胞第三节酶的发酵工艺条件与控制3.1培养基3.2发酵条件及控制19(3)溶解氧的控制A添加诱导物22体内基因重组主要通过接合、转导、转化等方法进行;也包括整个染色体的重组,主要的途径是原生质体融合。A提高微生物中原酶的产量B用微生物表达、生产动物或植物的酶基因C构建“多酶复合物”或多酶复合体系D通过移除、添加或置换基因中的某些简介,克隆表达进行酶分子改造研究发酵过程中细胞生长速度、酶产物生成速度、基质消耗速度以及环境因素对这些速度的影响学科。细胞浓度/(mg/mL)酶浓度/(单位/ml)A同步合成型酶的生物合成与细胞生长同步进行,当细胞进入旺盛生长期时,酶大量生成,细胞生长进入平衡期后,酶的合成随着停止。(生长偶联型。)B延续合成型酶的生物合成可以被诱导,但不受分解代谢阻遏物和反应产物阻遏,酶所对应的mRNA很稳定。C中期合成型酶的合成在细胞生长一段时间后才开始,而在细胞生长进入稳定期后,酶的合成也终止。受产物的反馈阻遏或分解代谢物阻遏,该类酶所对应的mRNA稳定性较差。D滞后合成型细胞生长一段时间或者进入平衡期以后才开始合成酶并大量积累(非生长偶联型)。很多水解酶的合成属于这一类型。酶合成受到培养基中阻遏物的阻遏作用,当阻遏物几乎被细胞用完解除阻遏后,酶才开始大量合成。若培养基中不存在阻遏物,酶合成可转为延续合成型。该类型酶所对应的mRNA稳定性很好。最理想的合成模式是延续合成型!4.2酶生产过程中产酶动力学与生长相关