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1.3同工酶(isozyme)的调节来源:组成:由两个或两个以上亚基构成的寡聚酶。合成过程:原级功能酶(基因性同工酶)——直接由编码基因表达而产生的同工酶;次生同工酶(翻译后同工酶)——多肽链经翻译后加工、组合而成的同工酶。举例:(AK,LDH)M型乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)LDH由H型和M型两型亚基构成的四聚体、五种同工酶。LDH1(H型):对丙酮酸亲和力低(Km大),对乳酸亲和力大;运动时,心肌可利用乳酸氧化产能;LDH5(M型):对丙酮酸亲和力高(Km小),运动时,骨骼肌可以加强糖酵解产生乳酸,补充能量;乳酸经过血循运至心肌组织利用。LDH同工酶谱临床诊断意义:心肌梗塞:血清LDH1↑;肝癌或急性肝炎:血清LDH5↑;白血病:血清LDH4↑意义:同工酶的存在,不仅使调节更加精细、更加合理;而且使临床诊断更加特异、更加灵敏.。1.4酶蛋白的酶促化学修饰调节1.4.1化学修饰机理1.4.2酶促化学修饰特点:(1)极大多数受化学修饰的酶,有无活性和有活性两种形式,并受不同的酶催化而互变;(2)化学修饰使酶蛋白发生共价键的变化(3)磷酸化修饰是一种耗能较少的经济有效的调节方式;(4)级联式的激活过程,对调节信号有快速、放大效应。Gs1.5钙调蛋白(又称钙调素,Calmodulin,CaM)是一种与Ca2+结合、并将Ca2+信号下传的一类钙结合蛋白。1.5.1钙调蛋白的分布分布广泛,但脑组织内含量最高;在细胞内,胞浆中含量最高;1.5.2钙调蛋白的分子结构CaM:148个aa、17KD、单链,热稳定,耐酸,分子内含(30%)酸性氨基酸,pI4.0,282nm有吸收高峰——可作为鉴定CaM的条件之一。CaM分子中有4个结合Ca2+的结构域:Ⅰ—8~40,Ⅱ—44~76,Ⅲ—81~113,Ⅳ—117~148:1.5.3Ca2+·CaM活性复合物静息状态时,胞内[Ca2+]10-7mol/L;细胞受到外界刺激后,胞内[Ca2+]↑→10-6mol/L,CaM+nCa2+CaM*·(Ca2+)n(n:1~4)(无活性)(有活性)CaM*·(Ca2+)n+EE*·CaM*·(Ca2+)n1.5.4CaM*·(Ca2+)n的调节作用(其下游靶蛋白或酶有20多种)(1)CaM*·(Ca2+)n调节胞内cAMP水平(2)CaM*·(Ca2+)n激活磷酸化酶b激酶→调节糖原分解细胞受刺激后:胞内[Ca2+]↑→亚基:CaM*·(Ca2+)n→磷酸化酶b激酶(全酶)被激活cAMP→PKA途径-亚基-P(活化)→激活-亚基→全酶被激活糖原分解-亚基-P→使-亚基-P变构而去磷酸→-亚基失活磷酸化酶b激酶(全酶)失活(3)CaM*·(Ca2+)n调节肌球蛋白轻链激酶(MLCK)1.4.2酶促化学修饰特点:(1)极大多数受化学修饰的酶,有无活性和有活性两种形式,并受不同的酶催化而互变;(2)化学修饰使酶蛋白发生共价键的变化(3)磷酸化修饰是一种耗能较少的经济有效的调节方式;(4)级联式的激活过程,对调节信号有快速、放大效应。1.5.4CaM*·(Ca2+)n的调节作用(其下游靶蛋白或酶有20多种)(2)CaM*·(Ca2+)n激活磷酸化酶b激酶→调节糖原分解