概述细胞凋亡的调控(diàokònɡ)细胞凋亡与疾病细胞凋亡的检测悉尼·布雷诺尔apoptosisConceptofapoptosis:体内外生理或病理(bìnglǐ)因素触发细胞内死亡程序→细胞死亡细胞(xìbāo)坏死与细胞(xìbāo)凋亡的区别细胞凋亡与细胞坏死的区别特征细胞凋亡细胞坏死诱导(yòudǎo)因素生理及弱刺激强烈刺激受累范围单个细胞多个细胞膜完整性保持到晚期早期即丧失细胞体积减小、固缩增大肿胀染色质凝聚成半月形稀疏成网状细胞器无明显变化肿胀破坏溶酶体保持完整破坏外溢细胞形状形成凋亡小体破裂成碎片炎症反应凋亡小体被吞噬有DNA分解机制核小体间解离随机降解基因活化ATP减少（新蛋白质合成）核酸内切酶激活膜损害、自由基损害凋亡的生理学意义:■胚胎发育期去除(qùchú)某些细胞■成人组织激素依赖性退化：子宫内膜、乳腺■维持内环境稳定去除(qùchú)潜在有害的自身反应性淋巴细胞■参与防御反应细胞毒T细胞凋亡过多或不足(bùzú)→→疾病：肿瘤艾滋病缺血性损伤（心肌梗死、脑卒中）病毒感染二、凋亡时细胞的主要(zhǔyào)变化细胞凋亡(扫描电镜)正常(zhèngcháng)细胞■DNA片段(piànduàn)化（DNAladdingpattern）■细胞膜磷脂(línzhī)酰丝氨酸外翻■大分子合成(héchéng)TFAR-19高表达细胞(xìbāo)凋亡的调控2凋亡(diāowánɡ)的过程及机制细胞凋亡信号(xìnhào)转导的一般特征：信号(xìnhào)转导系统具有多样性细胞凋亡与细胞增殖、分化过程中的信号(xìnhào)转导系统存在部分共同的通道细胞内同一信号(xìnhào)激活的多条途径存在互通的交叉点凋亡的起始(qǐshǐ)阶段：膜受体（死亡受体）途径线粒体途径死亡受体（deathreceptor,DR）肿瘤坏死因子受体超家族成员，跨膜蛋白，与相应配体结合(jiéhé)传递细胞信号Fas(CD95),TNFR1参与死亡受体信号转导的接头(jiētóu)蛋白：死亡结构域（deathdomain,DD）蛋白FADD：Fas相关死亡结构域FasL+Fas+FADD→→细胞凋亡（2）线粒体途径(tújìng)细胞色素(sèsù)C+Apaf-1+caspase9前体—凋亡体召集并激活caspase3→→细胞凋亡Apaf-1：凋亡蛋白酶活化因子凋亡的执行Caspase依赖(yīlài)的细胞凋亡(Cysteine，asparticacid，protease)大小亚基结合(jiéhé)（二聚体）caspase激活（四聚体）Caspase家族的分类凋亡启动亚类Caspase蛋白酶：Caspase8，Caspase9，Caspase10在凋亡启动阶段发挥作用凋亡效应(xiàoyìng)亚类Caspase蛋白酶：Caspase3，Caspase6，Caspase7在凋亡执行阶段发挥作用水解粘附分子，使细胞与周围组织脱离活化DNA酶，使DNA片段化水解DNA多聚酶，抑制核酸合成降解Rb蛋白，使细胞周期停滞(tíngzhì)剪切细胞内结构蛋白正常情况下，CAD(caspase-activatedDNase)与抑制物ICAD-DFF-45结合，存在于胞质中，无活性Caspase活化后降解ICAD，CAD激活并入核降解DNA使其片段化活化的CAD在核小体的连接区将DNA切断，形成(xíngchéng)约200bp整倍数的核酸片段Caspase非依赖的细胞凋亡(diāowánɡ)（Caspase-independentapoptosis）■凋亡(diāowánɡ)诱导因子（AIF）线粒体蛋白AIF释放到胞质内与抑制凋亡(diāowánɡ)的因子结合，从而促发凋亡(diāowánɡ)■钙超载钙超载引起(yǐnqǐ)凋亡机制3、细胞凋亡(diāowánɡ)的调控基因（Regulatedmechanismofapoptosis）Bcl-2基因（Bcelllymphoma/leukemia-2）广泛存在于造血细胞、上皮细胞、淋巴细胞、神经细胞(shénjīnɡxìbāo)及多种瘤细胞Bcl-2家族已发现15个成员，可分为3个亚族：Bcl-2亚家族：抑制细胞凋亡Bax亚家族：促进细胞凋亡BH3亚家族：促进细胞凋亡Bcl-2蛋白抑制凋亡的机制：■抑制线粒体PT孔开放，Cyt.c、AIF释放↓■结合和灭活Apaf-1，阻断(zǔduàn)caspase-9活化■特异性结合细胞色素C■维持细胞钙稳态促凋亡(diāowánɡ)基因（Bax,Bak,Bid,Bim,