熟悉光学显微镜下细胞的基本形态与结构.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-11 格式:PPT 页数:32 大小:6.9MB 金币:10 举报 版权申诉
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实验一细胞形态、细胞器的显微结构的观察一、实验目的二、实验原理经物镜形成倒立实像,经目镜进一步放大成像。显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数,还与显微镜的分辨力有关。制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78,所用介质的折射率越接近玻璃的越好。对于干燥物镜来说,介质为空气,镜口率一般为0.05~0.95;油镜头用香柏油为介质,镜口率可接近1.5。普通光线的波长为400~700nm,因此显微镜分辨力数值不会小于0.2μm,人眼的分辨力是0.2mm,所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X。在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高,各物镜的镜口率如下表:物镜镜口率(N.A.)工作距离(mm)10×0.255.4040×0.650.39100×1.300.11显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积,公式为:M=K1xK2焦点深度:显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。厚标本和薄标本基础知识数码互动显微镜2.体视显微镜荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:(能观察活细胞)5.暗视野显微镜暗视野显微镜(darkfieldmicroscope)的聚光镜中央有当光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4-200nm的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。6.相差显微镜7.偏光显微镜(对于双折射物质进行结构研究)偏光显微镜(polarizingmicroscope)用于检测具有双折射性的物质,如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。8.微分干涉差显微镜(图像具有浮雕感)DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比,其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。10.显微操作技术四、实验用品二、观察操作放上切片,将光源调到自己习惯的亮度。视度补偿:调节目镜双筒找到自己的瞳距,此时两眼镜下的图象重合在一起,横拉板上的数字(例如:64)就是自己的瞳距,然后将两只目镜外侧的刻度线调到瞳距的数字的位置。调焦:将绿色光标移至视野中央,开始观察,如需提问,按呼叫按钮。三、下课时的操作1.将光源亮度调到最低“1”刻度。2.关掉红色CCD电源开关,再关绿色主电源开关。3.套上显微镜套。4.耳机及凳放整齐。瞳距调节屈光度调节粗调松紧调节旋钮聚光镜中心调节孔径光栏调节孔径光栏开度与图象六、注意事项1.低、高倍镜的使用。七、实验报告1.描绘一个所观察细胞的基本形态结构。2.绘图比较所观察到的不同的细胞形态与结构。3.比较真核细胞和原核细胞的形态结构及其区别。4.简述显微镜的主要结构和操作要领。5.熟练显微镜的调节。