●测定水体中叶绿素a含量和同化系数Q●掌握初级生产力测定方法和估算二、方法原理海洋初级生产力测定方法有叶绿素法由于叶绿素a是浮游植物任一种群都具有的特征，而b或c不是任一种群都有，因此，通常用叶绿素a(Chl-a)表示初级生产力水平，其计算式为④式。Ca（mg/m3）=④C－①式的结果；V丙酮－丙酮体积；V海水－海水体积。叶绿素a丙酮萃取液受蓝光（340nm）激发产生红色荧光，用荧光计在波长670nm处测定提取液酸化前后荧光值，按⑤式计算：⑤因故⑤式成为⑥式：⑥Rb—酸化前荧光值Ra—酸化后荧光值R—叶绿素a酸化因子(随仪器而异）V丙酮—丙酮提取液体积（mL）V海水—过滤海水体积（L）Fd—荧光计所用量程换算因子(mg/m3)Fd值确定的方法：⑴标准叶绿素a校正：用纯叶绿素a配成母液，把母液稀释成一系列不同浓度的溶液并分别测定荧光读数，用直线回归法求出标定线的斜率Fd。⑵分光光度计校正(本实验采用此法)：取一定体积处于指数生长期的单细胞藻，丙酮萃取其叶绿素a，测其吸光值E，按①式计算提取液叶绿素a浓度Cchl-a，然后在荧光计测其荧光值Rb，依⑦式计算Fd。⑦Cadée和hegeman（1974）提出计算初级生产力简化公式：（8）式中，P－每日现场初级生产力；Pa－表层水中浮游植物潜在生产力；E－真光层深度；D－每日光照时间。因为表层水E＝1m水深内浮游植物潜在的生产力：（8）故可写成：(9)PP－每日生产力（mgC/m3d）；Ca－表层水中叶绿素-a含量（mg/m3）；D－每日的光照时间，冬天以12h计，夏天以13h计。Q－浮游植物光合作用速率与叶绿素-a含量之比值，单位mgC(mgChl-a)-1h-1，称为同化系数。4.同化系数的确定为得到适用于调查海区的同化系数，最好用C14示踪法现场测定。在无测定C14示踪法条件下可用黑白瓶作浮游植物光合作用速率的测定。根据浮游植物光合过程中释放的氧量换算成有机碳的固定量，以此固定值除以叶绿素a和培养时间即为同化系数Q。设符合光合作用的理想方程是CO2+H2O→CH2O+O2则产生的氧转换成固定碳，则有：（10）Q—同化系数[mgC(mgChl-a)-1h-1]h—光照时间(h)Chl-a—叶绿素a含量(mg/m3)；Ol、Od—“白”和“黑”瓶DO(mgO2/L)三、实验设备UV1600紫外光栅分光光度计GFY－160荧光光度计960MR荧光光度计LRH-250-G型光照培养箱离心机过滤器0.45μm微孔醋酸纤维滤膜医用真空吸引器2、玻璃器皿3、试剂(*为学生自配试剂）四、实验内容水样A平行样（20～30ml）先→→→→→→→根据表2的数据和实验步骤3的结果，按⑨式计算该样水域的初级生产力水平PP。五、数据处理和问题讨论六、注意事项