安图TORCH抗体亲和力检测培训课件.ppt
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安图TORCH抗体亲和力检测提纲抗体亲和力是整个抗体分子与抗原表位之间结合强度,即抗体的结合部位与相应抗原决定簇之间的非共价引力与斥力之和。抗体亲和力成熟理论模板学说(Templatetheory)免疫系统在按照抗原(模版)来制造更高亲和力的抗体TORCH抗体亲和力检测的意义对于巨细胞病毒IgM抗体阳性的样本,需要结合IgG抗体亲和力的结果进行分析。IgM抗体阳性,同时IgG抗体低亲和力,有较高风险。美国帕洛艾尔托医疗基金会弓形虫确认实验室,将弓形虫IgG亲和力抗体检测列为确认方法之一,用于排除假阳性及非急性感染。对IgM抗体阳性或可疑的样本,进行IgG抗体亲和力检测很有价值,如果IgG抗体为低亲和力,再进行羊水穿刺PCR检测是合适的选择。使用敏感方法检测TORCHIgG/IgMTORCH抗体亲和力检测现状抗体亲和力检测方法国内获得批准文号的产品及方法国外批准上市的主要厂家及方法巨细胞病毒亲和力试剂盒检测结果比较弓形虫亲和力试剂盒检测结果比较第一个国产TORCH五项抗体亲和力检测试剂盒(2013年获得批准文号)国家十二五规划863课题项目之一产品设计兼顾IgG检测灵敏度和高值样本OD值不超限产品原理:解离剂法产品方法:ELISA样本稀释:1/100孔外稀释反应模式:30分钟-10分钟-30分钟-10分钟加样量:稀释后样本、对照缓冲液、解离缓冲液、酶结合物均100ul/孔。波长设置:450/620nm双波长读数,如果样本OD值>3.0,用405/620nm双波长读数。结果计算:亲和力指数=解离缓冲液孔OD值/对照缓冲液孔OD值×100%BIOMEX血清转化盘48份样本的亲和力与感染时间的关系图1:安图试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化IgG+IgM-既往感染样本评价共同推进TORCH检测的规范化