中国实验诊断学1997年6月第1卷第3期—45—4.与癌转移有关的基因组成、识别、定位、性间变癌。但这个模型引进我国后转移少见或不见。原状和调控。因是宿主变了,在免疫原性上它们不相适应了。5.新抗癌药筛选、老抗癌药验证及其抗转移癌我们选建的上述3个模型的瘤原与宿主动物自的作用和特点。然也有这种关系,也需要有高度地相互适应性。要6.中药在癌转移防治上的作用特点。做到这一点,其必要的工作是:宿主动物保种和瘤本项工作自开展到现在已有11个年头。100多原保种。如果不能及时、切实地做好保种工作,就年前有人就把肿瘤与肿瘤病人、肿瘤与模型宿主动可能丧失这些模型,使它们象在我国的Lewis肺癌物的关系比做“种子与土壤”的关系。两者之间自那样“名存实亡”。如能遵照国家有关规定结合模型然有个适应与否的问题。对于模型现在称这种(瘤的特殊需要做好保种,完全保留和充分发挥其高自原与宿主)关系是在免疫原性上两者是否相互适应,发、双相“肺和浅表淋巴结”转移的特点,就能为相互一致。例如Lewis肺癌是一个高自发肺转移模国家创造经济效益和社会效益,为我国和世界肿瘤型。1951年它原发于一只/6(黑)小鼠,当防治工作服务。C57BL时成瘤率为100%,有4%消退,病理形态为未分化细胞因子检测技术及其应用鞠佃文曹雪涛细胞因子具有极强的生物学活性,可作为药物到数ng/ml的细胞因子,定量较准确,但试剂盒大用于临床许多疾病的治疗中。细胞因子发挥治疗作多价格昂贵。Petyovka等人[1]建立一种同源-用的浓度非常低,治疗指数也比较低,剂量的增加ELISA,固相和液相中都使用同一种单抗检测细胞一般都伴随明显的毒副作用。另一方面,细胞因子因子低聚体,灵敏度大大提高,检测限可达15pg/在体内具有重要的病理作用。在感染、炎症、自身ml。用此法测血浆中TNF(肿瘤坏死因子)、IL-8、免疫病、AIDS等疾病状态下,有些细胞因子明显增LT等细胞因子。高。通过检测血清或组织液中的细胞因子含量,可2.RIA检测方法采用同位素标记技术进行以对诊断和治疗作出评价,具有重要的临床意义。根抗原抗体反应的检测原理,具有特异性高,精确性据检测原理和手段的不同,细胞因子的检测技术大好的特点,能测出ng或pg水平的细胞因子。Pep-致分为三类:免疫学方法、生物学方法和分子生物pard等[2]在传统RIA基础上进行了改进,他们采用学方法。普通的放免试剂,将待测样本与兔抗IL-6单抗混合过夜,加入125I标记的IL-6孵育后再加入偶连磁粒细胞因子检测方法的羊抗兔IgG,最后在磁场中分离出免疫复合物,此一、免疫学检测方法法可测到0.1ng/ml的IL-6,样本体积只需50Ll,特细胞因子作为一种蛋白质抗原,可以特异性与异性高、变异小、尤其适合于混合样本中单一细胞其单克隆抗体结合,利用抗原抗体反应检测细胞因因子的检测。子近年来发展比较快,其方法包括酶联免疫吸附3.免疫荧光技术在细胞因子的检测中应用(ELISA)、放射免疫(RIA)、免疫荧光等。较少,原因是传统的荧光物质包括荧光素、胶体金1.ELISA检测方法目前的细胞因子检测试等灵敏度低,不稳定且定量不准确。但Ogata等人[3]剂盒多采用定量夹心法。该法适于测定细胞培养上采用镧系元素铕作为荧光物质标记抗体,检测清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小,可测TNF、IL-6都取得了很好的效果。细胞因子免疫捕获法(CytokineImmunotrap-作者单位:200433上海,第二军医大学免疫学教研室ping)的建立主要在于快速捕获组织、体液、上清中—46—中国实验诊断学1997年6月第1卷第3期刚刚分泌出的细胞因子,防止周围细胞及其他物质替代3H-TdR用于细胞因子的活性测定。对其降解。该法的原理是利用小珠——化学发光免干扰素(IFN)和肿瘤坏死因子(TNF)分别采疫方法[4]。结果表明,捕获法能及时检测到微量、易用细胞保护和细胞毒作用检测,IFN也可以用依赖降解的细胞因子,对于其他方法难以检测的细胞因细胞株检测。近年来的研究倾向于增加其灵敏度。Ju子,捕获法具有独到的优势,可用于细胞因子分泌等[9]发现加入适当的无机化合物如NaF可以大大动力学研究及临床标本的检测。SatohT等[5]把化提高TNF对肿瘤细胞的杀伤效率,从而可以大大学发光法和ELISA结合起来,建立了CL-ELISA提高细胞株检测TNF的灵敏度。对于具有趋化作方法并检测血清中的IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IFN、用的细胞因子,经典的方法采用Boyden小室进行GM-CSF等,检测灵敏度较ELISA方法提高了100检测。最近,Junger等[10]结合Boyd