药代动力学研究的内容药物化学结构的特点血浆样品的特点生物样品中的药物分析前处理的要点除蛋白质，分离纯化浓缩液液萃取法固相萃取法规模缩小的柱色谱法直接沉淀法超滤法血浆样品－加入提取溶媒（酸化或碱化）－涡旋－离心－取上清液－吹氮气浓缩－残渣溶解－过滤进样色谱分析液相色谱-质谱联用法的发展数据来源：AmericanSocietyforMassSpectrometry,2002LC/MS法测定人血浆中克拉霉素的浓度克拉霉素检测条件流动相:0.05%冰醋酸和乙腈（40∶60v/v）流速:0.2mL/min色谱柱:Shim-packODS150mm×2.0mmI.D.5μm柱温:40℃质谱离子化方式：电喷雾离子化（ESI）离子极性:Positive；选择性离子检测(SIM):克拉霉素m/z:748.5[M+H]+罗红霉素m/z:837.5[M+H]+内标物14-羟基克拉霉素m/z:764.5[M+H]+血浆样品的处理血浆样品,内标罗红霉素,碳酸钠溶液碱化后乙醚提取,上清液用氮气吹干。最后残渣乙腈溶解。方法的专属性克拉霉素、内标、14-羟基克拉霉素的保留时间分别为1.93min、1.93min、1.92min岛津自动前处理系统（Co-SenseforBALCMS）内容背景HPLC/LC-MS广泛应用于血浆或血清的代谢物分析和原药分析，一般的血浆和血清分析，需要对样本进行预处理，以除去蛋白质，这样会降低精确度和工作效率。引入了具有限制性通路媒介（restrictedaccessmedia-RAM）的预柱，可对血浆样本进行直接分析，而不必进行预处理。这样，可提高精确度、简化操作和提高工作效率。但是，使用限制性通路媒介柱，也存在一些问题，需解决的问题：回收率、灵敏度、耐用性。生物样品中的药物分析前处理的要点除蛋白质浓缩手工前处理的问题处理时间重现性药物回收率除蛋白、浓缩操作自动化的优点提高分析精度脱线处理时，难以保持操作完全一致，有时分析精度变差。提高操作简便性脱线处理时需操作熟练提高处理效率夜间可自动运行，大幅度地提高了处理效率前处理自动化的课题提高回收率及提高浓缩率提高回收率的手段方法Co-SenseforBA自动前处理系统的基本流路自动前处理系统的基本流路血浆（血清）样品的大量进样时的回收率？样品处理柱的容量不同进样体积的影响在线稀释泵提高回收率的原因Shim-packMAYI-ODS（RAM）预处理柱columnname;Shim-packMAYI-ODSpackingmaterial;silicaparticleoutersurfacemethylcelluloseinnersurfaceoctadecylsilylgroupparticlesize;50mmcolumnsize;4.6mmi.d.x10mmpHrange;2-7.5maximumpressure;20MPaCo-SenseforBA的流路构成在线自动稀释用旁通流路的效果自动浓缩带来的高灵敏度流动相(样品导入溶液)：100mM醋酸钠缓冲液<pH=4.7>Table.血浆样品中药物回收率(spiked2ug/mLeach,50uLinj.)出色的柱使用寿命Co-SenseforBA-LCMS系统的特长何种化合物可用LC/MS分析?LC/MS的优势对液相色谱分离组份进行强有力的定性确证强大的选择性未充分分离峰的鉴别大气压状态大气压下的离子化API方法的优势允许流速：0.001~1ml/min；操作温度：室温；雾化气流速N2：1.5L/min大气压下的离子化(API)原理大气压下化学离子化(APCI)大气压下的离子化大气压下化学离子化(APCI)SchematicdiagramofAPPI正离子或负离子模式采集数据?LC/MS2010EV的硬件结构CDL(CurvedDesolvationLine)单元和QoQ系统QoQ系统介绍Q-array中离子轨道示意图典型的LC/MS质谱图Co-SenseforBA-LCMS分析血浆样品分析条件each1ug/mL,5uL标准血浆中的药物1:倍他乐克r=0.999542:普萘洛尔r=0.999583:利多卡因r=0.999814:狄布卡因r=0.999785:布比卡因r=0.999860.01–1ug/mL,10uL,n=5,plasmaspiked提取液中含乙腈对回收率的影响耐用性(Chromatogram)Columnpressureatstarttime(MPa)色谱柱:Shim-packVP-ODS（2.0mmi.d.×150mmL）流动相:0.1%三氟醋酸/乙睛