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TextbookandReferencesExamsOutlineCellbreakageandfractionation1.1Whydoproteinpurification?1.2Purificationisatoughtask蛋白质分离纯化基本特征蛋白质分离纯化基本特征应遵循的基本原则分离纯化过程分离纯化过程LocationinCell分离纯化过程分离纯化过程纯化图表1.3Materialselectionandtreatment1.4Assayestablishment3、酶活测定方法Enzymeassays:Progresscurvemethod（进度曲线法）Enzymedilution（稀释）curve（曲线）Substratedilutioncurve4、pH对酶活力的影响TheeffectofpHonenzymeactivity：Bufferpreparation(缓冲液配制）BufferpreparationQ:CouldtherequiredmixtureofCH3COOHandCH3COONabemadebytitratingasolutionofCH3COONatothecorrectpHwithHCl?缓冲液Addsomeothercomponentsincasetheyareneeded：1.5Cellbreakageandfractionation细胞破碎方法细胞破碎方法细胞破碎方法细胞破碎方法细胞破碎方法Fractionation（分离）:Centrifugationisthemostwidelyusedproceduretoseparatethehomogenateintodifferentparts,orfractions.悬浮式转子（水平转子）沉降系数（sedimentationcoefficient）：生物大分子在单位离心力场作用下的沉降速度称为沉降系数。即沉降系数是微颗粒在离心力场的作用下，从静止状态到达极限速度所需要的时间。以Svedberg表示，简称为S，其量纲为秒，S=1×10-13s。小结：蛋白质分离的一般流程QuestionsforChapterI
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