会计学/一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的。(2)成分：一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，还需满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2．无菌技术煮沸消毒法(2)微生物的分离方法①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步分散开来。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到表面，进行培养。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。2．统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用。3．实验流程：土壤取样→制备→微生物的培养与观察→细菌的计数。三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶一种复合酶，它包括、和，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。2．纤维素分解菌的筛选原理(1)可以与纤维素形成红色复合物，但并不和发生这种反应。(2)纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。3．土壤中纤维素分解菌的筛选实验流程土壤取样—→→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生的菌落。/考点一[示例1]如下所示为培养某种微生物的培养基的配方，请回答：(3)该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是________和________；倒平板时，一般需冷却至________左右，在________附近操作。(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_____，至少应加入的物质是________，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入________，形成________色复合物，若产生________，则证明有纤维素分解菌存在。[解析](1)从培养基成分看，没有琼脂等凝固剂，属于液体培养基；从用途上分析，加入青霉素可以杀死细菌、放线菌，选择出霉菌、酵母菌等属于选择培养基。(2)该生物以培养基中的(CH2O)作碳源，为异养型微生物。(3)考查微生物培养的基本操作。(4)培养纤维素分解菌，是以纤维素作碳源，故应去除(CH2O)；培养细菌应去除能杀灭细菌的青霉素。可用刚果红与纤维素形成红色复合物，检测纤维素分解菌的存在。若存在，菌落周围会形成透明圈。[答案](1)液体选择(2)异养型酵母菌或霉菌(3)(CH2O)调整pH灭菌50℃酒精灯火焰(4)青霉素和(CH2O)琼脂和纤维素粉刚果红红透明圈划分标准划分标准(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。(2)选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。2．微生物的营养营养要素1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是()A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板2．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分如下表：C．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌D．甲培养基适于分离异养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析：根据所提供的甲、乙两种培养基的成分分析，两者之间的主要差别是：甲培养基以葡萄糖和淀粉作为有机碳源和能源，也有少量的无机碳源(CaCO3)；乙培养基无有机碳源和能源。两者之间的共同点是：都不含氮源。说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的微生物。考点二[示例2](2009·宁夏高考)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________________。(6)若用大肠杆菌进行实验，使