质粒提取实验.pptx
上传人:骑着****猪猪 上传时间:2024-09-14 格式:PPTX 页数:19 大小:2MB 金币:20 举报 版权申诉
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会计学基本过程载体载体的特点载体的类型质粒存在于细菌染色体外的小的共价、闭环双链DNA分子。质粒DNA的提取将菌液转移至1.5ml离心管中(尽量倒满)↓12000rpm/30s(重复一次)弃上清扣干,加入SolutionⅠ100μL,剧烈振荡打散菌体,室温3min↓(以下操作要轻柔)加入新配制的SolutionⅡ200μL,温和颠倒离心管4~5次混匀,室温放置3min↓(此时出现拉丝现象)加入预冷的SolutionⅢ150μL,温和颠倒离心管2~3次混匀,室温3min↓离心12000rpm/5min质粒DNA的上清400μL移至另一离心管中↓加等体积氯仿,轻微振荡↓离心12000rpm/2min转移上清液350μL至另一离心管↓加入2倍体积无水乙醇,轻轻混匀室温放置2min↓离心12000rpm/5min弃上清,加入70%乙醇洗涤沉淀↓离心12000rpm/2min(重复一次)弃上清,液体尽量倒净并在吸水纸上扣干↓室温放置15min干燥加入TER40μL溶解质粒SolutionISolutionIISolutionIII质粒的鉴定——琼脂糖凝胶电泳电泳基本原理影响电泳的因素琼脂糖凝胶分离范围实验流程注意事项