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正常值:O≤1:80;H≤1:160临床意义:1.“O”和“H”均高于正常值,可考虑为伤寒;恢复期较急性期增长4倍以上确定诊断。2.“O”抗体(IgM)出现较早,“H”抗体(IgG)出现较晚3.病程第2周以后,大多出现阳性反应,一般以第3、4周阳性率最高,病愈后,可持续数月。(二)酶联免疫(ELISA)试验方法:抗原(伤寒杆菌脂多糖或Vi抗原)包被+待测血清+第二抗体(酶标记)底物显色参考值:<1:20临床意义:1.早期诊断(发病1周后即可升高)2.检测抗Vi抗体,可以诊断伤寒带菌者二、抗链球菌溶血素“O”测定——溶血抑制法原理:抗链球菌溶血素“O”(ASO)存在于感染链球菌病人的血清中,可以和溶血素“O”特异性结合,使之失去溶血作用方法:病人血清倍比稀释+溶血素+红细胞观察溶血现象结果判定:无溶血现象的血清最高稀释倍数定为ASO的单位数。参考值:ASO<400U临床意义:1.链球菌感染1周,ASO↑,4~6周达高峰。2.风湿热:ASO↑。三、肝炎的免疫学检测(一)甲型肝炎(HAV)的免疫学检查:1.粪便中HAV抗原的检测ELISA夹心法方法:①标本处理:待测粪便+牛肉汤盐水冻融离心取上清(即待测抗原);②包被抗体;③加待测标本;④加酶标抗体(HRP-抗甲肝IgG);⑤加酶底物;⑥测定OD492。结果判断:待测标本OD值———————≥2.1阳性阴性对照OD值2抗HAV-IgM的检测抗体捕获ELISA法方法:抗人μ链包被+待检血清(含抗HAV-IgM)+HAAg+HRP-抗HAV-IgG+酶底物测定OD492。结果判断:待测标本吸光度值————————≥2.1阳性阴性对照吸光度值临床意义:发病4周后,几乎全部患者抗HAV-IgM为阳性,用于甲肝诊断。检测抗HAV-IgG可用于流行病学调查。(二)乙型肝炎的免疫学检测1.HBsAg的检测——反向间接血凝试验方法:致敏红细胞(抗HBsAg+RBC)+患者血清(含HBsAg)凝集2.抗HBs检测ELISA抑制法方法:抗HBs包被+HBsAg(已知浓度)+待测标本+HRP-抗HBs+酶底物目测或测定OD492结果判定:目测:阳性孔-无色或浅黄阴性孔-桔黄色OD值测定:<0.5血中HBV标志物检查法及其阳性意义标志物常用检测法阳性意义HBsAgELISA夹心法正在或曾经感染抗-HBsELISA抑制法曾感染或疫苗注射抗-HBc(IgM类)抗体捕获ELISA发病期,慢性恶化期抗-HBc(IgG类)ELISA抑制法曾感染,急性恢复期HBeAgELISA夹心法,RPHAHBV复制,感染性强抗-HBeELISA抑制法,PHA急性感染,趋向恢复HBV-DNAPCR法HBV复制前S2AgELISA夹心法HBV复制抗-前S2ELISA抑制法提示预后良好四、梅毒血清学检查1.未灭活血清反应素试验(unheatedserumreagintest,USR)玻片凝集法方法:病人血清和脂质抗原(心磷脂、卵磷脂和胆固醇混合物)各一滴玻片上混合振动4min观察结果结果判断:-(阴性)无凝集+(弱阳性)小凝集块++~+++(阳性)中或大凝集块2.快速血浆反应素试验(rapidplasmareagintest,RPR)方法:病人血清+RPR抗原(活性炭结合类脂质Ag)观察凝集颗粒或絮片结果判断:阴性无黑色凝集阳性明显黑色凝集颗粒或絮片临床意义:1.梅毒患者USR阳性者,70%~90%;RPR阳性者,80%~95%。2.某些麻风、SLE、硬皮病、类风湿性关节炎等也可出现USR假阳性。3.荧光密螺旋体抗体吸收实验(FAT-ABS)方法:病人血清(56℃,30min)加非致病螺旋体抗原吸收滴加于抗原(梅毒螺旋体)片+FITC-抗人IgG荧光显微镜检查。结果判定:++++++阳性±+可疑-阴性五、获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunodeficiencysyndrome,AIDS)的相关检测技术1.抗HIV抗体的检测:①酶联免疫吸附试验(ELISA)②明胶颗粒凝集实验(PA)③免疫荧光检测法(IFA)④免疫印记法(westernblot)⑤放射免疫沉淀法(RIP)应用:①、②和③用于筛查;④和⑤用于确定诊断。2.HIV病毒检测:①细胞培养分离病毒②检测HIV抗原。3.细胞免疫功能:①检测T细胞功能a.CD4T淋巴细胞计数b.迟发变态反应皮试c.有丝分裂原刺激反应②检测B细胞功能a.循环免疫复合物b.免疫球蛋白1.血清中抗HIV抗体检测间接免疫荧光法