植物病毒概述植物病毒的危害及作用植物病毒学研究历史植物病毒学研究历史植物病毒学研究历史第一节植物病毒的形态、结构与组分一、植物病毒的形态二、植物病毒的结构三、植物病毒的组分（一）蛋白质（二）核酸2.病毒核酸的比例4.卫星RNA（三）其它组分第二节植物病毒的复制和增殖第三节、植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节.植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第三节植物病毒病的症状特点第四节植物病毒的传播和移动一、植物病毒的有效传播二、介体传播介体与所传病毒之间的关系3．介体与病毒专化性识别的可能机制(二)昆虫介体2．叶蝉和飞虱(三)土壤中的介体三、非介体传播(二)无性繁殖材料和嫁接传播(三)种子和花粉传播四、病毒在植物体内的移动五、防治植物病毒病的基本原则第五节植物病毒的分类与命名一、植物病毒的分类病毒类似物(三)病毒的株系二、植物病毒的命名第六节植物病毒的鉴定原理一、生物学实验二、电子显微镜技术三、血清学技术琼脂双扩散法：在一定浓度的琼脂凝胶中，抗体和抗原互相扩散，在适当的位置形成沉淀；沉淀线的形状说明抗原和抗体的相互关系。如图4—12：(1)说明两种抗原相同，都与已知的抗血清反应；(2)说明两种抗原有一定的亲缘关系，但不完全相同；(3)说明抗血清不专化，含有两种以上的抗体。酶联免疫吸附(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay，ELISA)法：该方法利用了酶的放大作用，使免疫检测的灵敏度大大提高。与其它检测方法相比较，ELISA有突出的优点：一是灵敏度高，检测浓度可达1-10ng／m1;二是快速，结果可在几个小时内得到；三专化性强，重复性好；四是检测对象广，可用于粗汁液或提纯液，对完整的和降解的病毒粒体都可检测，一般不受抗原形态的影响；五是适用于处理大批样品，所用基本仪器简单，试剂价格较低,且可较长期保存。具有自动化及试剂盒的发展潜力。ELISA是实现“快速、准确、经济”检测的最好手段之一〔图4—l3四、核酸杂交及PCR技术聚合酶链式反应(PCR)是在短时间内大量扩增核酸的有效方法，用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。从已知序列合成两段寡聚核苷酸作为反应的引物，它们分别与模板DNA两条链上的各一段序列互补且位于待扩增DNA区段的两侧。反应时，首先在过量的两种引物及4种dNTP参与下对模板DNA进行加热变性。随之将反应混合液冷却至某一温度使引物与其靶序列发生退火。此后退火引物在耐热的洲A聚合酶作用下得以延伸。如此反复进行变性、退火和DNA合成这一循环。每完成一个循环，理论上就使目的DNA产物增加1倍，在正常反应条件下，经25—30个循环扩增倍数可达百万。PCR扩增在检测标本中病原的核酸序列、由少量RNA生成cDNA文库、生成大量DNA以进行序列测定、突变的分析等方向已经得到广泛的应用。五、物理化学等特性4．沉降系数及分子量沉降系数S是指一种物质在20℃水中在1达因(1／981g)的引力场中沉降的速度，单位是每秒若干厘米，因这一单位太大，多采用其千分之一，即Svedberg单位。植物病毒的S20ω常在50S到数千S之间。沉降系数的测定要用超速分析离心机，根据该病毒在一定离心力下沉降的速度来计算。有了沉降系数还可以来计算分子量。5．光谱吸收特性由于蛋白质和核酸都能吸收紫外线，蛋白质的吸收高峰在280nm左右，核酸在260nm左右。因此260／280的比值可以表示病毒核酸含量的多少，用于区分不同的病毒，比值小的多是线条病毒，比值高可能是球状病毒；对同一种纯化的病毒，紫外吸收值可以表示病毒的浓度，对未纯化的病毒其260／280比值偏离标准值的情况，说明病毒的纯度.文献中常有E0.1%1cm260nm值,表示该病毒在0．1％浓度，光径为1cm比色杯中在260nm处的吸收值。6．植物病毒的化学特性主要是指核酸的类型、核酸的链数以及核酸的分子量、核酸在病毒粒体中的百分含量等。病毒核酸的这些特性用在病毒的分科、分属之中。表4-4黄瓜花叶病毒属三种病毒在鉴别寄主植物上的症状反应第六节重要的植物病毒属及典型种一、烟草花叶病毒属及TMV二、黄瓜花叶病毒和CMV三、马铃薯Y病毒属及PVY第七节植物类病毒一、类病毒的发现和定义二、类病毒不同于病毒的主要特性植物病毒参考书