五.V。和Vi的测算（1）重量法但这种算法不够准确，主要原因是Vg难以计算，它和凝胶的水化程度有关。一般粗略地将其估算为1cm3／g干胶。2．Kd及Kav的测算3．分辨率洗脱分辨率图ΔVe＝Vi（KdB—KdA）＝ΔKdVi六.葡聚糖凝胶离子交换剂使用方法将以上处理好的葡聚糖凝胶离子交换剂，用20～30倍量与层析时所用的同种缓冲液浸泡（但浓度要高，如0.1～0.5mol／L），再用同种酸或碱调节至所需要pH值，放置1h后，待pH值不变即可减压过滤。分子量的测定方法有两种（2）标准曲线法对于特定的测定系统，先以3个以上（最好更多些）的已知分子的标准蛋白（目前已有配套标准蛋白系列产品出售）过柱，测取各自的Ve值。以Ve作纵坐标，LogM作横坐标制做标准曲线。在同一测定系统中测出未知物质的Ve值便可由标标准曲线求得分子量。分子量在10000～150000之间的球形蛋白用此法测出的分子量误差在10％左右。对于线性分子的误差还可大于此值。（四）分离多组分混合物G-50分离粗制胰岛素图八.数据处理凝胶层析拄洗脱的三部分示意图同时根据已测出的Vo和Vi以及通过量柱的直径和凝胶拄床高度计算出的Vt方便求出Kd和Kav。实验要求；标准样品九.凝胶过滤层析经常遇见的问题（1）胶面不平（7）胶不适当定磷法测定核酸含量1.样品消化(每两组或三组做一份)