结核病的实验室诊断技术及应用全球范围内结核病疫情急剧恶化全球1/3人口（约20亿）已感染了结核菌，人口的大规模流动结核病与艾滋病同时流行结核菌耐多药菌株的出现我国是世界上仅低于印度和印尼的第三结核病大国患病率高，新发患者93万/年，结核菌感染率为约40％死亡率高，每年死亡人数达13万耐药率高早期快速诊断与治疗成为制约结核病防控的关键因素常规结核病实验室检测方法诊断阳性率不到60％。《摘自2014年中国结核病监测报告》结核病检测技术发展历程一、细菌法直接涂片（阳性率低—5000以上细菌/ml；不能区分真假、死活）一、细菌法结核菌的培养一、细菌学检测的新方法—提高阳性率分枝杆菌固体培养与液体培养比较二、免疫学检测WHO关于血清学检测声明12T-SPOT相关指南快速—T-SPOT的实验步骤T-SPOT的应用三、结核DNA检测技术1.荧光定量PCR2.环介导恒温扩增法（LAMP）DNA检测---LAMPLAMP法和其他PCR法的比较LAMP法在结核菌检测中的应用26检测全程仅需6小时MSM4.XpertMTB/RIF检测技术GeneXpert应用1、TB复合群鉴定。2、利福平耐药检测。3、WHO推荐4、Xpert®MTB/RIF检测试剂的阳性检出率低于人们对分子生物学诊断试剂高敏感度的预期值，（1000CFU/ml）DNA用于临床检验的不足NASBA（国外）TMA（国外）SAT（国内）SAT技术是将核酸恒温扩增和实时荧光检测相结合的一种新型RNA检测技术。TB-RNA释放TB-SAT检测技术优点RNA诊断技术的优势TB-SAT检测区分MTB和NTM活菌检测技术，可用作肺结核治疗效果评估免疫法常有既往感染问题相比DNA,RNA检测能更好的体现疗效TB-SAT检测体液、病灶组织标本的灵敏度小结美国CDC关于RNA检测技术在TB诊断的指南中国结核病诊断专家共识结核实验室检测方法中推荐SAT五、耐多药结核病诊断现状结核耐药分子诊断技术结核病耐药与基因结核耐药分子诊断技术结核耐药分子诊断技术核心基因芯片技术同时鉴定4种一线药物5个基因13个位点总结——肺结核诊断建议上海市结核（肺）重点实验室